Что необходимо для проведения биологической пробы

Что необходимо для проведения биологической пробы

6. Биологическая проба

Перед переливанием контейнер с трансфузионной средой (эритроцитная масса или взвесь, плазма свежезамороженная, цельная кровь) извлекают из холодильника и выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин. Допустимо согревание трансфузионных сред в водяной бане при температуре 37°С под контролем термометра.

Биологическую пробу проводят независимо от объема гемотрансфузионной среды и скорости ее введения. При необходимости переливания нескольких доз компонентов крови биологическую пробу проводят перед началом переливания каждой новой дозы.

Экстренность трансфузии компонентов крови не освобождает от выполнения биологической пробы. Во время ее проведения возможно продолжение переливания солевых растворов.

При переливании компонентов крови под наркозом о реакции или начинающихся осложнениях судят по немотивированному усилению кровоточивости в операционной ране, снижению артериального давления и учащению пульса, изменению цвета мочи при катетеризации мочевого пузыря, а также по результатам пробы на выявление раннего гемолиза. В таких случаях переливание данной гемотрансфузионной среды прекращается, хирург и анестезиолог совместно с трансфузиологом обязаны выяснить причину гемодинамических нарушений. Если ничто, кроме трансфузии, не могло их вызвать, то данная гемотрансфузионная среда не переливается, вопрос дальнейшей трансфузионной терапии решается ими в зависимости от клинических и лабораторных данных.

Биологическая проба, также как и проба на индивидуальную совместимость, обязательно проводится и в тех случаях, когда переливается индивидуально подобранная в лаборатории или фенотипированная эритроцитная масса или взвесь.

Необходимо еще раз отметить, что контрольная проверка групповой принадлежности реципиента и донора по системам АВ0 и резус, а также проба на индивидуальную совместимость проводятся трансфузиологом непосредственно у постели реципиента или в операционной. Выполняет эти контрольные проверки только тот врач, который переливает (и он же несет ответственность за проводимые трансфузии).

Запрещено введение в контейнер с компонентом крови каких-либо других медикаментов или растворов, кроме 0,9% стерильного изотонического раствора хлорида натрия.

После окончания переливания донорский контейнер с небольшим количеством оставшейся гемотрансфузионной среды и пробирка с кровью реципиента, использованная для проведения проб на индивидуальную совместимость, подлежит обязательному сохранению в течение 48 часов в холодильнике.

Врач, проводящий переливание компонентов крови, при каждой трансфузии обязан зарегистрировать в медицинскую карту больного:

— показания к переливанию компонента крови;

— результат контрольной проверки групповой принадлежности крови реципиента по АВ0 и резус;

— результат контрольной проверки групповой принадлежности крови или эритроцитов, взятых из контейнера, по АВ0 и резус;

— результат проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента;

— результат биологической пробы.

Рекомендуется для каждого реципиента, особенно при необходимости многократных трансфузий компонентов крови, дополнительно к медицинской карте больного иметь трансфузионную карту (дневник), в которой фиксируются все трансфузии, проведенные больному, их объем и переносимость.

Реципиент после переливания соблюдает в течение двух часов постельный режим и наблюдается лечащим или дежурным врачом. Ежечасно ему измеряют температуру тела, артериальное давление, фиксируя эти показатели в медицинской карте больного. Контролируется наличие и почасовой объем мочеотделения и сохранение нормального цвета мочи. Появление красной окраски мочи при сохранении прозрачности свидетельствует об остром гемолизе. На следующий день после переливания обязательно производят клинический анализ крови и мочи.

При амбулаторном проведении гемотрансфузии реципиент после окончания переливания должен находиться под наблюдением врача не менее трех часов. Только при отсутствии каких-либо реакций, наличии стабильных показателей артериального давления и пульса, нормальном мочеотделении он может быть отпущен из лечебного учреждения.

Источник

Техника проведения биологической пробы

Показания:необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательств.

Приготовить:жгут, подушечка, стерильные шарики, спирт 70%, лейкопластырь, пинцет, система для внутривенного вливания крови, флакон с кровью, стерильные лотки, кожный антисептик, стерильные перчатки, часы, емкости для отработанного материала, контейнеры с дезинфицирующими растворами.

Последовательность действий:

Оценка результата:

а) если у реципиента не отмечается нарушений гемодинамики и нет жалоб – проба отрицательная, переливание производить можно;

б) при наличии беспокойства, болей в пояснице, озноба, мелькание «мушек» перед глазами и других жалоб, пробу следует оценить как положительную, переливание необходимо прекратить. Больного берут под наблюдение.

Окончание манипуляции:

Источник

Алгоритм проведения гемотрансфузии

Правила клинического использования донорской крови и (или)ее компонентов.

Трудноопределимые группы крови

Неспецифическая агглютинация наблюдается при аутоиммунной гемолитической анемии и других аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся адсорбцией аутоантител на эритроцитах, при гемолитической болезни новорожденных, эритроциты которых нагружены аллоантителами матери.

Кровяные химеры. Кровяными химерами называют одновременное пребывание в кровяном русле двух популяций эритроцитов, отличающихся по группе крови и другим антигенам.

Трансфузионные химеры возникают в результате многократного переливания эритроцитной массы или взвеси группы 0 (I) реципиентам другой группы. Истинные химеры встречаются у гетерозиготных близнецов, а также после пересадки аллогенного костного мозга.

Другие особенности. Определение группы крови АВ0 и резус принадлежности может быть затруднено у больных в связи с изменением свойств эритроцитов при различных патологических состояниях (у больных циррозом печени, при ожогах, сепсисе).

Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре

для проведения проб на индивидуальную совместимось используется кровь ( сыворотка) больного, взятая перед трансфузией или не более чем за 24 часа, при условии хранения при температуре +4+2°С.

Проба на совместимость с применением 33%полиглюкина

В пробирку вносят 2 капли (0, 1 мл) сыворотки реципиента 1 каплю (0, 05) мл эритроцитов донора и добавляют 1 каплю (0, 1 мл) 33% полиглюкина.

Пробирку наклоняют до горизонтального положения, слегка потряхивая, затем медленно вращают таким образом, чтобы содержимое ее растеклось по стенкам тонким слоем. Контакт эритроцитов с сывороткой больного при вращении пробирки следует продолжать не менее 3 мин.

Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.

Ошибочный порядок расположения реагентов.
Температурные условия (определение группы крови производят при температуре не ниже 15°Си не выше 25°С)
Соотношение реагентов и исследуемых эритроцитов.
Продолжительность наблюдения. (позволяет выявить слабый агглютиноген А_2, характеризующийся замедленной агглютинацией)

Биологическую пробу проводят независимо от объема гемотрансфузионной среды и скорости ее введения.

При необходимости переливания нескольких доз компонентов крови биологическую пробу проводят перед началом переливания каждой новой дозы.

в течение 3 мин наблюдают за реципиентом, контролируя у него пульс, дыхание, артериальное давление, общее состояние, цвет кожи, измеряют температуру тела

такую процедуру повторяют еще дважды. Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов, как озноб, боли в пояснице, чувство жара и стеснения в груди, головной боли, тошноты или рвоты, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания данной трансфузионной среды.

Экстренность трансфузии компонентов крови не освобождает от выполнения биологической пробы.

Врач, проводящий переливание компонентов крови обязан:

1.Определить показания для проведения гемотрансфузионной терапии с учетом противопоказаний.

2. Получить информированное добровольное согласие реципиента или его законного представителя на проведение гемотрансфузионной терапии по установленной форме.

3. Провести первичное определение групповой принадлежности крови больного по системе АВО.

КАТЕГОРИЧЕСКИ ЗАПРЕЩАЕТСЯ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ДАННЫЕ О ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ ПО СИСТЕМАМ АВО И РЕЗУС ИЗ ПАСПОРТА, ПРЕДШЕДСТВУЮЩЕЙ ИСТОРИИ БОЛЕЗНИ И ДРУГИХ ДОКУМЕНТОВ.

4. Внести в направление в клинико-диагностическую лабораторию (форма № 207/у), сведения о результате определения группы крови по системе АВО, серии диагностикумов, трансфузионный и акушерско-гинекологический анамнез. Подписать направление

5. Ознакомиться с заключением клинико-диагностической лаборатории. Перенести данные о групповой и резус-принадлежности больного на лицевую часть медицинской карты стационарного больного с указанием даты анализа и своей фамилии.

6. Оформить предтрансфузионный эпикриз.

7. Провести макроскопическую оценку лабораторного желатина и диагностикумов.

8. Провести макроскопическую оценку каждой дозы гемотрансфузионной среды.

9. Повторно непосредственно перед трансфузией определить группу крови реципиента по системе АВО

10. Определить группу крови по системе АВО с эритроцитсодержащей средой.

11. Проконтролировать соответствие паспортных данных.

12. Провести пробу на совместимость крови реципиента и крови донора (гемотрансфузионной среды) по системам АВО и резус.

13. Зафиксировать результат изосерологических исследований в протоколе операции переливания крови.

ПРОБЫ НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ ПО СИСТЕМЕ АВО И РЕЗУС НЕ ЗАМЕНЯЮТ ДРУГ ДРУГА.

ПРОВОДЯТСЯ ВО ВСЕХ СЛУЧАЯХ С ОБРАЗЦАМИ КРОВИ ИЗ КАЖДОГО КОНТЕЙНЕРА.

ОБЯЗАТЕЛЬНЫ, ДАЖЕ ЕСЛИ ЭРИТРОЦИТНАЯ МАССА ИЛИ ВЗВЕСЬ ПОДОБРАНЫ РЕЦИПИЕНТУ ИНДИВИДУАЛЬНО В СПЕЦИАЛИЗИРОВАННОЙ ЛАБОРАТОРИИ.

14. Провести биологическую пробу. Зафиксировать её результат в протоколе операции переливания крови.

15. Контролировать состояние реципиента, темп введения трансфузионной среды.

16. При изменении состояния больного в первую очередь исключить посттрансфузионное осложнение.

17. Оценить показатели артериаль­ного давления, пульса, результаты термометрии.

18. Зарегистрировать гемотрансфузию:

•в дневнике наблюдений медицинской карты стационарного больного;

•в журнале регистрации переливаний крови и её компонентов (форма № 009/у) ;

•заполнить протокол гемотрансфузии

19. Провести макрооценку первой порции мочи.

20. Назначить клинические анализы крови и мочи на следующие сутки после гемотрансфузии.

21. Провести оценку суточного диуреза, водного баланса, результатов анализов мочи и крови.

22. Наблюдать за больным с отражением результатов наблюдения в дневнике истории болезни. При изменении клинической симптоматики и лабораторных показателей до выписки больного из стационара в первую очередь исключить посттрансфузионное осложнение.

Осложнения
-Иммунные осложнения ( острый гемолиз, гипертермическая негемолитическая реакция, анафилактический шок, некардиогенный отек легких)

-Неиммунные осложнения (острый гемолиз, бактериальный шок, ОССН, отек легких)

-Непосредственные осложнения (аллоиммунизация антигенами эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов или плазменными белками, гемолиз, реакция >, посттрансфузионная пурпура)

-Иммунные ( гемолиз, Реакция «трансплантат против хозяина», Посттрансфузионная пурпура, Аллоиммунизация антигенами эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов или плазменными белками

А. Г. Румянцев, В. А. Аграненко. Клиническая трансфузиология-М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1997.

Е. Б. Жибурт. Трансфузиология-С.: ПИТЕР, 2002.

Рагимов А. А. Трансфузиология. Национальное руководство-М.: ГЭОТАР Медиа, 2012.

Алгоритмы исследования антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител в сложнодиагностируемых случаях. Методические рекомендации N 99/181 (утв. Минздравом России 17. 05. 2000)

Приказ Минздрава России от 25. 11. 2002 N363 » Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови»

Приказ Минздрава России от 02. 04. 2013 N183н » Об утверждении правил клинического использования донорской крови и (или) ее компонентов»

Источник

Проба на совместимость перед переливанием компонентов крови

Проба на совместимость перед переливанием компонентов крови. Технология выполнения. Пособие для врачей./ГОУ ДПО КГМА Росздрава. — Казань, 2011. — 35 с.

В пособии представлены технологии выполнения проб на индивидуальную совместимость перед переливанием донорских компонентов крови в целях предотвращения посттрансфузионных осложнений гемолитического типа. Приведены требования к образцам крови, к специалистам, проводящим пробы, а также порядок проведения проб в зависимости от вида переливаемой трансфузионной среды и особенности проведения проб у отдельных категорий пациентов.

Пособие содержит перечень оборудования и реагентов, необходимых для проведения проб на индивидуальную совместимость.

Предназначено для врачей всех специальностей, проводящих гемотрансфузионную терапию. Может быть использовано при подготовке специалистов в высших и средних медицинских образовательных учреждениях.

Учебное пособие утверждено и рекомендовано к изданию Методическим советом ГОУ ДПО КГМА Росздрава от «_____» __________2011 г. (протокол № _____).

С учебным пособием можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ДПО КГМА Росздрава по адресу 420012, г. Казань, ул. Муштари, д. 11

Введение. Целью проведения проб на индивидуальную совместимость является предотвращение трансфузий несовместимых компонентов крови. Под совместимостью понимается благоприятное сочетание крови донора и реципиента. Биологически невозможное их сочетание по антигенам и антителам различных групповых систем определяет несовместимость крови донора и реципиента.

Группа крови АВО — это набор групповых антигенов А и В и естественных анти-А, анти-В антител, который наследственно детерминирован и не меняется в течение жизни.

Система Резус — одна из наиболее полиморфных антигенных систем эритроцитов человека. Она включает около 50 серологически различных антигенов, не считая слабых, переходных и парциальных форм. На эритроцитах человека имеются 5 основных антигенов системы Резус (D, C, c, E, e). Наибольшее клиническое значение имеет антиген D. Обладая выраженными иммуногенными свойствами, антиген D в 95% является причиной гемолитической болезни новорожденного, а также причиной тяжёлых посттрансфузионных осложнений. Лиц, имеющих антиген D, относят к резус положительным (Rh+), не имеющих антиген D относят к резус отрицательным (Rh-).

В настоящее время известно более 236 антигенов эритроцитов, которые распределяются в 29 генетически независимых системах. Первостепенное клиническое значение имеют антигены систем АВО и Резус. Эритроцитарные системы Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd имеют меньшее практическое значение, так как они сравнительно редко вызывают сенсибилизацию. Эти системы становятся значимыми при многократных гемотрансфузиях эритроцитной массы, повторных беременностях. Антитела ко всем этим антигенам могут образоваться у человека любой группы крови системы АВО, Резус (независимо от резус-принадлежности). Они образуются при тех же условиях, что и антитела анти-D (многократные гемотрансфузии эритроцитной массы, повторные беременности) и могут служить причиной посттрансфузионных осложнений гемолитического типа и гемолитической болезни новорожденных. Если реципиенту, в крови которого имеются антитела, перелить кровь донора, эритроциты которого содержат антигены, против которых направлены антитела, такая кровь будет разрушаться в организме реципиента, т.е. она является для него несовместимой.

В настоящем пособии представлена технология выполнения проб на индивидуальную совместимость, приведены требования к образцам крови, к специалистам, проводящим пробы, а также порядок проведения проб в зависимости от вида переливаемой трансфузионной среды и особенности проведения проб у отдельных категорий пациентов.

Технология выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови:

1. Характеристика методики выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови

1.1. Требования к образцам крови

Перед процедурой забора крови на проведение проб на совместимость у реципиента уточняют его фамилию, имя и отчество. Берут сухую чистую пробирку, на которую наносят следующую информацию о пациенте: Ф.И.О., дату забора крови, для стационарных больных — номер медицинской карты. Кровь пациента забирают из вены в количестве 3-5 мл и переносят в подписанную пробирку. Для получения сыворотки пробирку с образцом крови оставляют при комнатной температуре не менее чем на 1 час или, в экстренных случаях, центрифугируют в лабораторной центрифуге при скорости 1500-2000 об/мин. в течение 5 минут. Используют образец крови реципиента, хранившийся при t+2 0 С…+8 0 С не более двух дней.

Гемолизированная кровь для исследований не используется. При наличии гемолиза процедуру взятия крови повторяют.

Предтрансфузионный образец крови реципиента хранят при температуре +2 0 С…+8 0 С в течение 5 суток. Это необходимо для дальнейшего исследования крови реципиента в специализированной лаборатории службы крови при возникновении посттрансфузионного осложнения.

В случае возникновения посттрансфузионного осложнения предтрансфузионный образец крови реципиента и остатки трансфузионной среды направляют в специализированную лабораторию службы крови для исследования.

1.2. Требования к помещению

Иммуногематологические исследования проводят в помещении с естественным освещением, температура воздуха в помещении должна быть в пределах +15 0 С …+25 0 С.

1.3. Общие требования к проведению проб на совместимость

Перед трансфузией компонентов крови проводят пробы на индивидуальную совместимость по системам АВО и Резус, и биологическую пробу.

При проведении проб на индивидуальную совместимость по системе АВО выявляется и совместимость по системе MNS, а при проведении проб на индивидуальную совместимость по системе Резус выявляется совместимость и по другим клинически значимым системам групп крови (Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd).

Пробы на совместимость непосредственно перед каждой трансфузией проводит врач, производящий трансфузию консервированной крови и её компонентов, после контрольного переопределения групповой принадлежности крови реципиента и донора, и контрольного переопределения резус — принадлежности крови реципиента. Экстренность трансфузии не освобождает от проведения проб на совместимость.

1.4. Требования к объемам исследований, в зависимости от вида переливаемой трансфузионной среды

1.4.1. Переливание переносчиков газов крови

Перед переливанием переносчиков газов крови проводят пробы на индивидуальную совместимость крови реципиента и донора, в том числе аутодонора, по системам АВО и Резус, а также биологическую пробу после проведения контрольных исследований групповой и резус-принадлежности крови пациента и групповой принадлежности эритроцитов донора (аутодонора).

Пробы на совместимость по группам крови АВО и Резус проводят отдельно, они не могут заменить друг друга, так как антитела разного характера требуют разных методик для своего выявления.

Пробу на индивидуальную совместимость по системе АВО проводят по одной из следующих методик: проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре или в гелевом тесте.

Пробу на индивидуальную совместимость по системе Резус проводят по одной из следующих методик: проба с применением 33% раствора полиглюкина, проба с применением 10% раствора желатина или в гелевом тесте.

1.4.2. Переливание корректоров гемостаза и фибринолиза, средств коррекции иммунитета

Перед переливанием корректоров гемостаза и фибринолиза, средств коррекции иммунитета крови проводят биологическую пробу.

1.5. Требования к специалистам

Проведение проб на индивидуальную совместимость проводят специалисты, имеющие подготовку по вопросам иммуногематологии на специализированных циклах усовершенствования на базе учреждений дополнительного профессионального образования и (или) на базе учреждений службы крови Республики Татарстан (см. таблицу 1).

Таблица 1

Требования к специалистам для выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови

Выполнение проб на совместимость перед переливанием компонентов крови

Дополнительные требования к медицинскому персоналу

Стационар, в том числе дневной стационар, в амбулаторно-поликлинических условиях

Перед каждым переливанием крови и её компонентов

Врач, непосредственно проводящий трансфузию

Должны иметь специальную подготовку по вопросам иммуногематологии на специализированных циклах усовершенствования на базе учреждений дополнительного профессионального образования и (или) на базе учреждений службы крови РТ не реже одного раза в 5 лет

2. Материальные ресурсы

Для выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови должно быть оснащено отдельное место (или специальное помещение), которое оборудуется согласно требованиям приказа МЗ РФ №2 от 09.01.1998 г. «Об утверждении инструкций по иммуносерологии».

2.1 Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения

Таблица 2

Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения, необходимые для выполнения проб на совместимость, а также альтернативные приборы и изделия медицинской техники.

Наименование прибора, изделия
медицинской техники и др.

Количество приборов,
инструментов, изделий
медицинской техники

Альтернативный прибор, изделие медицинской техники

Проба на совместимость по группам крови системы АВО (на плоскости)

Стол с покрытием из пластика

Планшеты для иммуногематологических исследований

1 шт. на 1 исследование

Тарелка белого цвета фарфоровая или эмалированная

Автоматическая пипетка переменного объёма (20-200 мкл)

Палочка из пластмассы

Песочные часы на 5 минут

Лупа с 4-6-кратным увеличением

Штатив лабораторный на 10 гнёзд

Центрифуга лабораторная ОПН-3

Проба на совместимость по системе Резус

с применением 33% раствора полиглюкина (в пробирке)

Стол с покрытием из пластика

Автоматическая пипетка переменного объёма (20-200 мкл)

Песочные часы на 5 минут

Лупа с 4-6-кратным увеличением

Штатив лабораторный на 10 гнёзд

Центрифуга лабораторная ОПН-3

Проба на совместимость по системе Резус

с применением 10% раствора желатина (в пробирке)

Стол с покрытием из пластика

Баня водяная на 46-48 0 С

Термостат на 46-48 0 С

Автоматическая пипетка переменного объёма (20-200 мкл)

Пробирки тонкостенные (вместимостью не менее 10 мл)

Песочные часы на 15 минут

Лупа с 4-6-кратным увеличением

Штатив лабораторный на 10 гнёзд

Центрифуга лабораторная ОПН-3

Проба на совместимость по системе АВО и системе Резус

с использованием гелевых диагностических карт

Стол с покрытием из пластика

Автоматическая пипетка переменного объёма

Штатив лабораторный на 10 гнёзд

Центрифуга лабораторная ОПН-3

Центрифуга для гелевых карт

Инкубатор на 37 0 С

Термостат на 37 0 С

2.2. Реактивы

Для выполнения проб на индивидуальную совместимость перед трансфузией крови и её компонентов необходимы реактивы, которые представлены в таблице 3.

Таблица 3

Реагенты, необходимые для постановки проб на совместимость

Документ, регламенти-рующий использование
реактива

Количество реактива, необходимое для выполнения
1-го исследования

Сроки и особенности хранения реактива, работы с ним*

Проба на совместимость по системе АВО

на плоскости при комнатной температуре

Раствор натрия хлорида, 0,9%

Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 №363 «Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови»

Проба на совместимость

с использованием 33 % раствора полиглюкина

Раствор полиглюкина, 33,0%

Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 №363 «Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови»

Раствор натрия хлорида, 0,9%

Проба на совместимость

с использованием 10 % раствора желатина

Раствор желатина, 10,0%

Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 №363 «Об утверждении инструкции по применению компонентов крови»

Раствор натрия хлорида, 0,9%

Проба на совместимость по системе АВО и системе Резус

с использованием гелевых диагностических карт

Диагностические карточки Coombs+

Инструкции, прилагаемые к диагностическим карточкам

От 1/4 до 1/3 шт,. в зависимости от используемой диагностической карты.

Раствор для приготовления суспензии исследуемых эритроцитов

Инструкция, прилагаемая к раствору

От 0,5 до 1,0 мл, в зависимости от производителя

* — Температура внутри холодильной камеры, где хранятся реактивы, контролируется средним медработником дважды в день. Показания термометра регистрируются в «Журнале регистрации температурного режима хранения диагностических стандартов для иммуногематологических исследований» (см. приложение 1).

2.3 Прочий расходуемый материал

Для выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови используется прочий расходуемый материал (см. таблицу 4).

Таблица 4

На 1 тампон: вата — 3,0 гр.,

Для подсушивания пипетки и стеклянной палочки

Медицинские перчатки одноразовые

1 пара на каждые 3 часа работы

Заменить немедленно при нарушении целостности или сильном загрязнении.

Раствор натрия хлорида, 0,9%

Для промывания пипеток и палочек

Спирт этиловый медицинский, 70,0%

3,0 гр. на 1 обработку

Для обработки рук персона-ла после окончания работы

В соответствии с методичес-кими указаниями по приме-нению дез. средств, разре-шённых к использованию в РФ и РТ

Для дезинфекции биологического материала, лабораторной посуды и рабочего места.

Наконечники для автомати-ческих пипеток переменного объема, одноразовые

4 шт. на 1 исследование

3. Порядок проведения проб на совместимость

Целью проведения проб на совместимость является предотвращение трансфузии консервированной крови и её компонентов, несовместимых с кровью реципиента. Для проб на совместимость используют сыворотку крови реципиента и образец крови донора.

Если больному переливается консервированная кровь и её компоненты из нескольких контейнеров, пробы на совместимость проводят с каждым контейнером, даже если на них обозначено, что компоненты крови получены от одного и того же донора.

3.1 Пробы на индивидуальную совместимость по системе АВО

3.1.1 Проба на совместимость по группам крови системы АВО (на плоскости)

Порядок проведения исследования:

Пробу производят на планшете со смачиваемой поверхностью.

1. Планшет маркируют, для чего указывают Ф.И.О. и группу крови реципиента, Ф.И.О. и группу крови донора и номер контейнера с кровью.

2. Из пробирки с исследуемой кровью реципиента берут осторожно пипеткой сыворотку и наносят на планшет 1 большую каплю (100 мкл).

3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут маленькую каплю (10 мкл) донорских эритроцитов и наносят рядом с сывороткой реципиента (соотношение сыворотки и эритроцитов 10:1).

4. Капли перемешивают стеклянной палочкой.

5. Наблюдают за реакцией 5 минут, при постоянном покачивании планшета. По истечении этого времени добавляют 1-2 капли (50-100 мкл) раствора натрия хлорида, 0,9%.

Трактовка результатов реакции:

реакция в капле может быть положительной или отрицательной.

а) положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов, агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких или крупных красных агрегатов. Кровь несовместима, переливать нельзя! (см. рисунок 1).

Рисунок 1. Кровь реципиента и донора несовместима

б) при отрицательном результате (-) капля остаётся гомогенно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются. Кровь донора совместима с кровью реципиента (см. рисунок 2).

Рисунок 2. Кровь донора совместима с кровью реципиента

3.2. Пробы на индивидуальную совместимость по системе Резус

3.2.1. Проба на совместимость с использованием 33 % раствора полиглюкина

Порядок проведения исследования:

1. Для исследования берут пробирку (центрифужную или любую другую, вместимостью не менее 10 мл). Пробирку маркируют, для чего указывают Ф.И.О. и группу крови реципиента, и Ф.И.О донора, номер контейнера с кровью.

2. Из пробирки с исследуемой кровью реципиента осторожно берут пипеткой сыворотку и вносят 2 капли (100 мкл) на дно пробирки.

3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут одну каплю (50 мкл) донорских эритроцитов вносят в эту же пробирку, добавляют 1 каплю (50 мкл) 33% раствора полиглюкина.

4. Содержимое пробирки перемешивают путём встряхивания и затем медленно поворачивают по оси, наклоняя почти до горизонтального положения так, чтобы содержимое растекалось по ее стенкам. Эту процедуру выполняют в течение пяти минут.

5. Через пять минут в пробирку добавляют по 3-5 мл физ. раствора. Содержимое пробирок перемешивают 2-3-кратным перевертыванием пробирок (не встряхивая!)

Трактовка результатов реакции:

результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооружённым глазом или через лупу.

Если в пробирке наблюдается агглютинация в виде взвеси мелких или крупных красных комочков на фоне просветлённой или полностью обесцвеченной жидкости, значит, кровь донора не совместима с кровью реципиента. Переливать нельзя!

Если в пробирке равномерно окрашенная, слегка опалесцирующая жидкость без признаков агглютинации эритроцитов — это значит, что кровь донора совместима с кровью реципиента в отношении антигенов системы Резус и другими клинически значимыми системами (см. рисунок 3).

Рисунок 3. Результаты исследования проб на совместимость по системе Резус (с использованием 33% раствора полиглюкина и 10% раствора желатина)

3.2.2. Проба на совместимость с использованием 10 % раствора желатина

Раствор желатина необходимо тщательно просмотреть перед употреблением. При помутнении или появлении хлопьев, а также при потере свойств застудневания при t+4 0 С…+8 0 С желатин непригоден.

Порядок проведения исследования:

1. Для исследования берут пробирку (ёмкость не менее 10 мл). Пробирку маркируют, для чего указывают Ф.И.О., группу крови реципиента и донора, номер контейнера с кровью.

2. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут одну каплю (50 мкл) донорских эритроцитов, вносят в пробирку, добавляют 2 капли (100 мкл) 10% раствора желатина, прогретого на водяной бане до разжижения при температуре +46 0 С…+48 0 С. Из пробирки с кровью реципиента осторожно берут пипеткой сыворотку и вносят 2 капли (100 мкл) на дно пробирки.

3. Содержимое пробирки встряхивают для перемешивания и помещают на водяную баню (t+46 0 С…+48 0 С) на 15 минут или в термостат (t+46 0 С…+48 0 С) на 45 минут.

4. После окончания инкубации пробирку извлекают, добавляют 5-8 мл физ. раствора, содержимое пробирки перемешивают путём одно-двукратного перевёртывания и оценивают результат исследования.

Трактовка результатов реакции.

результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооружённым глазом или через лупу, а затем просматривают путём микроскопирования. Для этого каплю содержимого пробирки помещают на предметное стекло и просматривают под малым увеличением.

Если в пробирке наблюдается агглютинация в виде взвеси мелких или крупных красных комочков на фоне просветлённой или полностью обесцвеченной жидкости — это значит, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не должна быть ему перелита.

Если в пробирке равномерно окрашенная, слегка опалесцирующая жидкость без признаков агглютинации эритроцитов — это значит, что кровь донора совместима с кровью реципиента в отношении антигенов системы Резус и другим клинически значимым системам (см. рисунок 3).

3.3. Проба на совместимость в гелевом тесте

При постановке в гелевом тесте пробы на совместимость проводятся сразу по системе АВО (в микропробирке Neutral) и проба на совместимость по системе Резус (в микропробирке Coombs).

Порядок проведения исследования:

1. Перед исследованием проверяют диагностические карты. Не используют карты, если в геле имеются взвешенные пузырьки, микропробирка не содержит надосадочной жидкости, наблюдается уменьшение объёма геля или его растрескивание.

2. Микропробирки подписывают (фамилия реципиента и номер донорского образца).

3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, автоматической пипеткой берут 10 мкл донорских эритроцитов, помещают в центрифужную пробирку.

4. Добавляют 1 мл разводящего раствора.

5. Вскрывают необходимое количество микропробирок (по одной микропробирке Coombs и Neutral).

6. Автоматической пипеткой вносят по 50 мкл разведенных донорских эритроцитов в микропробирки Coombs и Neutral.

7. Добавляют в обе микропробирки по 25 мкл сыворотки реципиента.

8. Инкубируют при t+37 0 С 15 минут.

9. После инкубации карточку центрифугируют в центрифуге для гелевых карт (время и скорость задаются автоматически).

Трактовка результатов:

если осадок эритроцитов расположен на дне микропробирки, то проба считается совместимой (см. рисунок 4 №1). Если агглютинаты задерживаются на поверхности геля или в его толще, то проба несовместима (см. рисунок 4 №№2-6).

Рисунок 4. Результаты исследования проб на индивидуальную совместимость по системе Резус гелевой методикой

3.4. Биологическая проба

Для проведения биологической пробы используются подготовленные к трансфузии кровь и её компоненты.

Биологическую пробу проводят независимо от объема гемотрансфузионной среды и скорости ее введения. При необходимости переливания нескольких доз крови и её компонентов биологическую пробу проводят перед началом переливания каждой новой дозы.

однократно переливают 10 мл гемотрансфузионной среды со скоростью 2-3 мл (40-60 капель) в минуту, затем переливание прекращают и в течение 3 мин наблюдают за реципиентом, контролируя у него пульс, частоту дыхания, артериальное давление, общее состояние, цвет кожи, измеряют температуру тела. Такую процедуру повторяют еще дважды. Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов, как озноб, боли в пояснице, чувство жара и стеснения в груди, головной боли, тошноты или рвоты, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания данной трансфузионной среды. Образец крови направляют в специализированную лабораторию службы крови для проведения индивидуального подбора эритроцитной массы.

Экстренность трансфузии компонентов крови не освобождает от выполнения биологической пробы. Во время ее проведения возможно продолжение переливания солевых растворов.

При переливании крови и её компонентов под наркозом о реакции или начинающихся осложнениях судят по немотивированному усилению кровоточивости в операционной ране, снижению артериального давления и учащению пульса, изменению цвета мочи при катетеризации мочевого пузыря, а также по результатам пробы на выявление раннего гемолиза. В таких случаях переливание данной гемотрансфузионной среды прекращается, врач-хирург и врач анестезиолог-реаниматолог совместно с врачом-трансфузиологом обязаны выяснить причину гемодинамических нарушений. Если ничто, кроме трансфузии, не могло их вызвать, то данная гемотрансфузионная среда не переливается, вопрос дальнейшей трансфузионной терапии решается ими в зависимости от клинических и лабораторных данных.

Биологическая проба, также как и проба на индивидуальную совместимость, обязательно проводится и в тех случаях, когда переливается индивидуально подобранная в лаборатории или фенотипированная эритроцитная масса или взвесь.

После окончания переливания донорский контейнер с небольшим количеством оставшейся гемотрансфузионной среды, использованной для проведения проб на индивидуальную совместимость, подлежит обязательному сохранению в течение 48 часов при температуре +2 0 С…+8 0 С.

Реципиент после переливания соблюдает в течение двух часов постельный режим и наблюдается лечащим или дежурным врачом. Ежечасно ему измеряют температуру тела, артериальное давление, фиксируя эти показатели в медицинской карте больного. Контролируется наличие и почасовой объем мочеотделения и цвет мочи. Появление красной окраски мочи при сохранении прозрачности свидетельствует об остром гемолизе. На следующий день после переливания обязательно производят клинический анализ крови и мочи.

При амбулаторном проведении гемотрансфузии реципиент после окончания переливания должен находиться под наблюдением врача не менее трех часов. Только при отсутствии каких-либо реакций, наличии стабильных показателей артериального давления и пульса, нормальном мочеотделении пациент может быть отпущен из лечебного учреждения.

3.5. Регистрация результатов проб на совместимость

Результат контрольных исследований проб на совместимость (раздельно по каждому виду) заносят в трансфузионную карту медицинской карты больного (см. приложение 2).

3.6. Индивидуальный подбор

Индивидуальный подбор переносчиков газов крови проводится в учреждениях службы крови (СПК или ОПК) врачом клинической лабораторной диагностики, имеющим специальную подготовку по иммуногематологии на специализированных циклах и на базе учреждений службы крови РТ.

3.6.1. Показания к индивидуальному подбору

3.6.2. Требования к образцам крови, направляемым на индивидуальный подбор

Образец крови для проведения индивидуального подбора забирают в две пробирки:
1 пробирка — с консервантом (3 мл),
2 пробирка- без консерванта (5 мл).

В качестве консерванта используют раствор ЭДТА или раствор цитрата натрия, 5% Соотношение исследуемой крови и консерванта для цитрата натрия — 10:1, для ЭДТА- 100:1.

При необходимости индивидуального подбора, новорожденному ребёнку выделяют две пробирки:

1 пробирка — с образцом крови ребёнка (не менее 1,5 мл),

2 пробирка — с образцом крови матери (5 мл).

Обе пробирки должны быть обязательно подписаны (Ф.И.О., дата забора, № истории болезни).

Направление оформляется согласно приложению № 3.

Индивидуальный подбор переносчиков газов крови является предварительной процедурой. Если эритроцитная масса или взвесь подобраны реципиенту индивидуально в специализированной лаборатории, врач, выполняющий трансфузию, перед переливанием определяет группу крови и резус-принадлежность реципиента, группу крови донора и проводит только одну пробу на совместимость на плоскости при комнатной температуре и в начале трансфузии-биологическую пробу.

3.7. Дополнительные сведения об особенностях выполнения проб на совместимость

Существуют категории реципиентов, у которых встречаются затруднения при проведении проб на индивидуальную совместимость.

Таблица 5

Категории пациентов с затруднениями при проведении проб на индивидуальную совместимость

Приложения

Приложение 1

(наименование медицинского учреждения)

ЖУРНАЛ РЕГИСТРАЦИИ ТЕМПЕРАТУРНОГО РЕЖИМА ХРАНЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ

ДЛЯ ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Начат «____» ______________ 20___ г. Окончен «____» ______________ 20___ г.

1. Журнал ведется отдельно для каждого холодильника, предназначенного для хранения диагностических стандартов.

2. Показания термометра регистрируются ежедневно.

3. Страницы должны быть пронумерованы, прошнурованы, скреплены печатью учреждения и подписью руководителя медицинского учреждения.

Дата контроля

Показания термометра

Подпись ответственного лица

Источник