Что значит полигональные клетки
Интерпретация клеточного состава, особенности изменений в клетках при различных патологических процессах
Основу цитологической диагностики составляет изучение клеток, изменений в их расположении и строении. Критерии цитологической диагностики включают анализ клеточного и неклеточного состава: количество клеток, наличие клеток разного типа, их расположение в структурах или разрозненно, вид структур, размер, форма, строение клеток и ядер, наличие или отсутствие клеточного и ядерного полиморфизма и другие параметры. По характеру и степени выраженности отклонения от нормального клеточного состава судят о природе патологического процесса. По признакам, характерным для определенных тканей, судят о тканевой принадлежности опухоли. При этом учитывают фон препарата — элементы крови, бесструктурное вещество, коллоид, жир и др.
Количество клеток в мазке определено прочностью межклеточных связей и обилием стромы. Богатый клеточный состав бывает в низкодифференцированных опухолях, гемато- и лимфосаркоме, нейроэндокринных опухолях. Скудный материал и даже единичные клетки встречают, в частности, при скиррозном и дольковом раке молочной железы.
Расположение клеток. Клетки в мазке могут располагаться разрозненно или в виде структур. Для доброкачественных поражений характерно правильное, упорядоченное расположение клеток, одинаковое расстояние между ними, сходные размеры клеток и ядер, образующих структуру. Для злокачественных новообразований характерны структуры (комплексы, пучки) с неупорядоченным расположением клеток.
Размеры клеток и ядер. Размеры клеток по возможности оценивают в сравнении с размерами нормальных клеток того же типа. Размеры ядер обычно сравнивают с размером эритроцита (в норме достаточно стабильным, примерно 7 мкм). Соотношение размера ядра и цитоплазмы (ядерно-цитоплазматическое соотношение) также весьма различно в разных клетках, и при его оценке учитывают степень отклонения этого параметра от нормальной клетки того же типа.
Фон препарата часто имеет большое диагностическое значение. Фоном могут быть элементы периферической крови или воспаления, связанного с инфекцией, сопровождающего опухолевый и другие процессы, клеточный детрит, межуточное вещество. Фон препарата может иметь диагностическое значение при определении тканевой принадлежности или гистологической формы опухоли.
При реактивных и фоновых поражениях чаще всего увеличено число клеток (гиперплазия, пролиферация), размер ядер и отмечается их более интенсивная окраска (гиперхромия). Хроматин распределен сравнительно равномерно. В некоторых ядрах (особенно характерно для железистого эпителия) увеличен размер ядрышек. При некоторых состояниях изменен размер клеток и наблюдаются особенности окрашивания цитоплазмы.
Изменения в клеточном составе мазка при злокачественной опухоли характеризуются клеточным и ядерным полиморфизмом (различием характеристик разных клеток), образованием структур, отличающихся от нормальных, изменением фона препарата; для многих злокачественных опухолей характерен так называемый опухолевый диатез — реакция соединительной ткани на инвазию (прорастание опухоли).
Если количество материала достаточное, клетки сохранены, хорошо приготовлен и окрашен препарат, то можно без характеристики микроскопической картины формулировать цитологический диагноз с указанием на гистологическую форму опухоли и степень дифференцировки (низкодифференцированная аденокарцинома, плоскоклеточный рак с ороговением, фиброаденома).
Что значит полигональные клетки
Меланоциты – гетерогенная группа клеток, развивающаяся из мультипотентных клеток нейроэктодермального гребня [1].
Меланоциты кожи – отростчатые пигментные клетки неврогенного происхождения, локализующиеся в эпидермисе, и составляющие примерно 15 – 25 % от общего числа клеток эпидермиса, и дерме [2].
Меланоциты имеют характерную ультраструктуру. В их цитоплазме содержится значительное количество различных органелл. Цитоплазматическая сеть выражена хорошо, количество митохондрий значительно. В клетках сильно развит пластинчатый комплекс Гольджи. В цитоплазме много везикул, рибосом и небольшое количество лизосом. Ядро имеет неровные контуры мембраны с неглубокими впячиваниями и очень плотной нуклеоплазмой [3].
Отростки меланоцитов содержат множество меланосом, рибосом и контактируют с несколькими кератиноцитами при помощи десмосом. Каждый меланоцит секретирует гранулы меланина в связанные с ним кератиноциты. Это партнерство «меланоцит – кератиноцит» называют меланиновой эпидермальной единицей. Один меланоцит контактирует с 36 (40) кератиноцитами [4, 5]. Последствия нарушения работы меланоцитов объединяют в 3 группы: гиперпигментация, гипопигментация и смешанные гипер- / гипопигментационные расстройства. Одним из наиболее распространённых и сложных заболеваний является одна из наиболее агрессивных злокачественных опухолей – меланома кожи, составляющая не более 4,0 % всех новообразований кожи, которая, согласно статистике, является причиной примерно 80 % случаев летальных исходов в онкодерматологии [1], что связано с недостаточной изученностью проблемы диагностики и лечения этого заболевания. Заболеваемость меланомой кожи в период с 2000 по 2010 г. увеличилась с 3,18 до 3,95 случая на 100 тыс. населения. Среднегодовой темп прироста составил 1,99 %, а общий прирост заболеваемости 21,81 %.
Целью нашего исследования является изучение клеточных линий меланоцитов и их биологии при меланоме, а также оптимизация протоколов культивирования меланоцитов для возможности дальнейшего углубленного изучения вопроса.
Эксперимент был поставлен на меланоцитах, выделенных из злокачественных новообразований кожи больных меланомой. Каждой клеточной линии был присвоен индивидуальный код. После забора материал сразу помещали в транспортную среду на сутки при комнатной температуре. В лаборатории Клеточных технологий НИЦ ФППББ УлГПУ биоптаты механически измельчались на фрагменты размером около 5х5 мм, и инкубировались в 0,25 % растворе трипсина 18 часов при температуре 37°С, в СО2 – инкубаторе («Binder», Германия) с содержанием СО2=5 %. Далее проводили отделение слоя эпидермы от дермы, фрагменты эпидермы и опухоли помещали в 0,05 % раствор ЭДТА на 5 минут для дезагрегации клеток. Суспензию центрифугировали при 1500 об/мин 5 минут. После этого сбрасывали супернатант и к полученной взвеси клеток приливали 5 мл готовой полной среды. Для культивирования было выбрано 2 основные среды – RPMI-1640 и Melanocytes Growth Medium с содержанием ЭТС 5 % и 20 %. Полученную смесь помещали в культуральные флаконы объемом 25 см3 и культивировали в СО2–инкубаторе. Культивирование осуществляли на протяжении 8 пассажей, каждый из которых высевали на 15 флаконов. Подсчёт клеток вели с использованием счетчика клеток («Bio – Rad TC10», Сингапур), красителем трипановый синий. Через 48 часов после инокуляции осуществляли замену среды. В дальнейшем среду меняли при необходимости (около одного раза в неделю), исходя из визуальных характеристик, таких как: – цвет среды – светло – розовая с желтизной, что говорит об изменении рН.
После формирования монослоя (спустя 2 – 4 недели), наличие которого просматривали на инвертированном микроскопе Axio Vert. A1 («Carl Zeiss», Германия), клетки снимали с поверхности флакона 0,25 % раствором трипсина – Версена (1:1) и проводили пересадку, предварительно обработав флакон PBS.
Для определения цитологических характеристик полученные клетки окрашивали гематоксилином Карацци и водно-спиртовым раствором эозина. При увеличении: х40; х100 определяли: размеры и количество клеток, образование комплексов, размеры и формы клеток и ядра, ядерно-цитоплазматическое отношение, количество и форму ядрышек, наличие митозов. Размеры ядер и клеток измеряли с помощью программного обеспечения ZEN («Carl Zeiss», Германия). Форма клеток показывает уровень их дифференцировки и развития. Ядерно-цитоплазматическое отношение (ЯЦО) – отношение между площадями цитоплазмы и ядра живой клетки является важной морфологической характеристикой, которая оценить уровень метаболизма, выявить проявление компенсаторных реакций. Изменение размеров ядер и ядерно-цитоплазматического отношения могут служить индикатором воспалительных процессов, а также проявлениями некоторых форм онкологических заболеваний. Если ЯЦО равно или больше 1, это значит, что в клетке большое ядро и мало цитоплазмы, что указывает на низкий уровень метаболизма этих клеток. Такие клетки функционально неактивны, однако они обладают способностью делиться, в норме. Наоборот, клетки, у которых ЯЦО меньше 1, имеют большой объем цитоплазмы и, следовательно, большое количество органелл. Они высокодифференцированы и способны активно функционировать.
В первой экспериментальной модели – культивирование меланоцитов на среде RPMI-1640, было сформировано 2 подгруппы:
1) с содержанием ЭТС – 5 % (клеточные линии Mel I, Mel II);
2) с содержанием ЭТС – 20 % (клеточные линии Mel III, Mel IV).
Для среды RPMI-1640 с содержанием ЭТС 5 % количество клеток х105/мл = 3,95±1,01, из них процент живых клеток составил – 40,07 % в пятом пассаже.
В соответствии с измеряемыми параметрами для каждой клеточной линии была составлена характеристика.
Проведенный анализ позволил выявить, что для линии онкомеланоцитов Mel I свойственны следующие характеристики: клетки варьируют по размеру от 306,7 мкм2 до 1250,6 мкм2 и лежат разрозненно. Формы клеток данной линии различны от полигональной до звездчатой и трёхгранной. Встречаются атипичные клетки с крупными ядрами (до 230,2 мкм2), округлой формы. ЯЦО составляет 0,17. Количество ядрышек чаще от 2 до 4. При визуальном исследовании препарата, в поле зрения был выявлен один митотически делящийся меланоцит.
В линии онкомеланоцитов Mel II клетки варьируют по размеру от 170,4 мкм2 до 2441,4 мкм2. Клетки расположены разрозненно и имеют полигональную, звездчатую, трёхгранную и веретеновидную формы. Встречаются и гигантские клетки с крупными ядрами (до 571,8 мкм2), округлой формы. ЯЦО составляет 0,26. Количество ядрышек колеблется от 2 до 4. В поле зрения было выявлено 2 митотически делящихся меланоцита.
Для среды RPMI-1640 с содержанием ЭТС 20 % количество клеток х105/мл = 5,97±1,5, из них процент живых клеток составил – 72,33 % (пятый пассаж).
Линии онкомеланоцитов Mel III свойственны следующие характеристики: клетки варьируют по размеру от 289,7 мкм2 до 590,9 мкм2. Фиксировалось как разрозненное расположение клеток, так и плотные скопления. Размер ядра варьирует от 35,7 мкм2 до 166,5 мкм2, округлой, либо вытянутой формы. ЯЦО составляет 0,25. Количество ядрышек чаще от 2 до 3. В поле зрения выявляется митотически делящийся меланоцит.
Клеточная линия опухолевидных меланоцитов Mel IV имела размер клеток от 134,4 мкм2 до 747,4 мкм2. Меланоциты группировались в плотные скопления, но местами были заметны и единичные, разрозненно лежащие клетки. Форма меланоцитов полигональная, трёхгранная, веретеновидная. Размер ядра варьирует от 25,4 мкм2 до 91,4 мкм2, округлой, либо вытянутой формы. ЯЦО составляет 0,18. Количество ядрышек чаще от 1 до 5. Во второй экспериментальной модели – культивирование меланоцитов на среде Melanocytes Growth Medium, было сформировано 2 подгруппы:
1) с содержанием ЭТС – 5 % (клеточные линии Mel V, Mel VI);
2) с содержанием ЭТС – 20 % (клеточные линии Mel VII).
Для среды Melanocytes Growth Medium с содержанием ЭТС 5 % количество клеток х105/мл = 5,74±0,9, из них процент живых клеток составил – 53,20 % (пятый пассаж).
Для линии онкомеланоцитов Mel V свойственны следующие характеристики: клетки варьируют по размеру от 122,8 мкм2 до 712,8 мкм2, лежат разрозненно. Форма клеток: полигональная, звездчатая, трёхгранная, веретеновидная, округлая. Размеры ядер клеток варьируют от 41,0 мкм2 до 251,0 мкм2. По форме ядра округлые. Количество ядрышек чаще 1 – 4, редко встречается 5. В поле зрения было выявлено четыре митотически делящихся меланоцита.
Линии Mel VI характерны следующие измерения: клетки варьируют по размеру от 199,3 мкм2 до 2321,4 мкм2 и местами группируются в неплотные скопления. Форма различна от полигональной, звездчатой, трёхгранной, округлой. Ядра клеток размерами от 31,0 мкм2 до 609,1 мкм2, округлой формы. ЯЦО = 0,31, количество ядрышек чаще 1 – 4. В поле зрения было выявлено 4 митотически делящихся меланоцита.
Для среды Melanocytes Growth Medium с содержанием ЭТС 20 % количество клеток х105/мл = 6,51±1,2, из них процент живых клеток составил – 94,00 % (пятый пассаж). Онкомеланоцитам Mel VII свойственны следующие характеристики: клетки варьируют по размеру от 149,2 мкм2 до 1076,0 мкм2, расположены они разрозненно, но местами могут группироваться в неплотные скопления. Были выявлены клетки полигональной, звездчатой, трёхгранной формы. Ядра клеток размерами от 50,4 мкм2 до 235,8 мкм2, округлой формы. ЯЦО =0,21. Количество ядрышек чаще 1 – 4, в крупных клетках может быть больше.
В ходе эксперимента по изучению биологии меланоцитов мы пришли к выводу о том, что оптимальной средой для культивирования клеточных линий меланоцитов является среда Melanocytes Growth Medium с содержанием ЭТС 20 %, так как именно среди клеток линии, культивируемых на этой среде, наблюдалась наибольшая численность живых меланоцитов (94 %).
Наиболее благоприятным для культивирования оказался пятый пассаж.
Также была выявлена ведущая морфологическая форма онкомеланоцитов – полигональная (Mel I, Mel II, Mel VI, Mel VII), трёхгранная (Mel III, MelV), веретеновидная форма (Mel IV), преобладающее количество отростков у звёздчатых меланоцитов – 5–6. Наибольшее ядерно-цитоплазматическое отношение = 0,31 у линии Mel VI, культивируемой на среде Melanocytes Growth Medium с содержанием ЭТС 5 %, что указывает на пониженный уровень метаболизма и вероятную онкогенность клеток.
Что значит полигональные клетки
Лаборатория патоморфологии НИИ пульмонологии
СПб ГБУЗ «Городское патологоанатомическое бюро»
Санкт-Петербургский НИИ фтизиопульмонологии
НИИ пульмонологии Санкт-Петербургского ГМУ им. акад. И.П. Павлова
Зернисто-клеточная опухоль дыхательных путей
Журнал: Архив патологии. 2013;75(3): 34-39
Двораковская И. В., Ариэль Б. М., Орлов А. Н., Качан Л. В. Зернисто-клеточная опухоль дыхательных путей. Архив патологии. 2013;75(3):34-39.
Dvorakovskaia I V, Ariél’ B M, Orlov A N, Kachan L V. Airway granular cell tumor. Arkhiv Patologii. 2013;75(3):34-39.
Лаборатория патоморфологии НИИ пульмонологии
Описаны клинико-морфологические и иммуногистохимические особенности 13 зернисто-клеточных опухолей верхних дыхательных путей. Показано, что эти опухоли имеют те же гистологические и иммуногистохимические особенности, что и зернисто-клеточные опухоли другой локализации. Обсуждается проблема гистогенеза этих опухолей. В настоящее время существует ряд оснований для того, чтобы считать их опухолями нейрогенной природы, близкими к шванномам. Вместе с тем нельзя не учитывать имеющиеся морфологические и иммуногистохимические доводы в пользу того, что зернистоклеточные опухоли обнаруживают цитотипические, а не гистотипические свойства, которые не позволяют безоговорочно относить их к опухолям из нервной ткани. Скорее всего, зернисто-клеточные опухоли относятся к гистогенетически неоднородной, сборной группе, в связи с чем вопрос об их месте в классификации опухолей нуждается в дальнейшем исследовании с привлечением критериев, разработанных отечественными гистологами и онкоморфологами.
Лаборатория патоморфологии НИИ пульмонологии
СПб ГБУЗ «Городское патологоанатомическое бюро»
Санкт-Петербургский НИИ фтизиопульмонологии
НИИ пульмонологии Санкт-Петербургского ГМУ им. акад. И.П. Павлова
Зернисто-клеточные опухоли (ЗКО) составляют, согласно определению (ICD-O code 9580/O), группу новообразований различной этиологии с многообразными клиническими проявлениями в зависимости от их локализации [1, 2]. Они встречаются в основном в области головы и шеи (70%), в том числе в толще языка (30%), у лиц 30—50 лет (у женщин в 3 раза чаще, чем у мужчин). Описаны также случаи возникновения данных образований в детском возрасте. Среди всех доброкачественных опухолей ЗКО составляет 6—10% [3, 4].
Цитологические особенности этих опухолей привлекли к себе внимание А.И. Абрикосова [5, 6], которому, по единодушному признанию отечественных и зарубежных авторов, принадлежит абсолютный приоритет в их описании. ЗКО встречаются также в коже и подкожной клетчатке молочных желез, верхних и нижних конечностей и во многих внутренних органах, чаще всего дыхательной системы, таких как гортань, трахея и бронхи [7—10], и пищеварительной системы (в пищеводе, толстой кишке) [11, 12].
ЗКО — большей частью одиночные опухоли: лишь в 10% наблюдений отмечаются множественные узлы в коже и внутренних органах.
За редкими исключениями ЗКО принадлежат к доброкачественным новообразованиям. Их клиническая картина обусловлена локализацией во внутренних органах, тогда как медленный рост в коже и подкожной клетчатке в виде плотного узла диаметром 0,3—3 см является, как правило, бессимптомным.
Микроскопическая структура ЗКО настолько характерна, что делает диагностику простой и надежной [13—15]. Опухоль состоит из отдельных гнезд, лент и пучков крупных клеток многоугольной формы с мелкоячеистой ацидофильной цитоплазмой, в которой имеются многочисленные ацидофильные зерна и глыбки. При тройной окраске по Массону одни зерна окрашиваются в розовый цвет, другие — в бледно-голубой, третьи — в розовато-лиловый [12, 16]. Эти гранулы ШИК-позитивны, окрашиваются альциановым синим, не расщепляются амилазой и соответствуют лизосомам. Наряду с нежными эозинофильными зернами встречается и более грубая зернистость — ярко-эозинофильная. Ее элементы окружены светлым ореолом и рассматриваются как остатки «гигантских лизосом» [17].
Бóльшая часть объема клеток ЗКО занята цитоплазмой. Ядра клеток сравнительно мелкие, округлые, овальные или неправильной формы, гиперхромные. В узких полосках опухолевой ткани они располагаются в средней части клетки, по ее оси, а в крупных гнездах и пучках разбросаны в разных местах. На поперечных срезах таких структур в одной клетке встречается до 4—5 ядер.
Ядерная атипия для ЗКО не характерна. Митозы встречаются крайне редко.
Необычный вид часто приобретает эпителий, покрывающий ЗКО: здесь отмечаются метаплазия и псевдоэпителиоматозная гиперплазия, выраженная в таком масштабе, что при поверхностном осмотре создается впечатление о высокодифференцированном плоскоклеточном раке. Развитие такой гиперплазии связывают с экспрессией факторов роста, таких как эпидермальный фактор роста и трансформирующий фактор роста α (TGF-α) [18].
Между зернистыми клетками, составляющими основную массу опухолевой ткани, располагаются фибробласты и своеобразные гистиоциты треугольной формы с грубозернистой эозинофильной цитоплазмой, которые встречаются в литературе под названием «угловатые тельца».
При электронно-микроскопическом исследовании в цитоплазме опухолевых клеток определяются ограниченные мембранами осмиофильные гранулы разной величины и формы. Так, в составе наиболее крупных гранул имеются пластинчатые структуры, а мелкие зернисты на всем протяжении. Во всех гранулах содержатся фрагменты разрушенных клеток, миелиновые фигуры, митохондрии, аксоноподобные структуры, крупные пузырьки [21—23].
Анализ хромосомного набора в клетках ЗКО, проведенный в единичных случаях, обнаружил диплоидию или гиперплоидию в доброкачественных вариантах и анеуплоидию — в злокачественном варианте.
Хотя ЗКО являются доброкачественными, после оперативного удаления они часто рецидивируют.
Злокачественные ЗКО встречаются редко (менее чем в 2% от общего числа ЗКО) и в основном на конечностях (например, на бедре), а не в области головы и шеи, как доброкачественные ЗКО. Они отличаются быстрым ростом с обширной локальной деструкцией, часто изъязвляются и широко метастазируют. Их иммунофенотип тот же, что и иммунофенотип доброкачественных ЗКО [24—27].
Различают два типа злокачественных ЗКО:
1) при котором отсутствуют резко выраженные гистологические признаки злокачественности (атипия, число митозов не более 2 на 10 полей зрения при большом увеличении), а имеются явные клинические признаки злокачественности, такие как большой размер, быстрый деструктивный рост, изъязвление. При микроскопическом исследовании таких опухолей обнаруживаются некрозы, инвазия в лимфатические сосуды, обилие клеток веретеновидной формы, пузырьковидные ядра клеток с крупными ядрышками;
2) с явными гистологическими признаками злокачественности как в первичном узле, так и в метастазах опухоли. С помощью маркеров пролиферации Ki-67 в опухоли обнаруживается большое число меченых клеток. Кроме того, резко выражена экспрессия р53.
Злокачественные ЗКО рецидивируют многократно еще до начала метастазирования. Метастазы появляются в течение первых двух лет. Прогноз при этом плохой: 60% больных погибают в течение 3 лет.
Ряд вопросов возникает при дифференциальной диагностике ЗКО. Кроме оценки степени агрессивности опухоли и сути псевдоэпителиоматозной гиперплазии, в ряде случаев возникает необходимость различать ЗКО, метастазы рака молочной железы [28] и злокачественную меланому кожи [29, 30]. Проводится также дифференциальная диагностика между ЗКО и опухолями нервной системы, например такими как неврилеммома, малакоплакия, онкоцитарный карциноид, онкоцитома [31—33].
Определенные диагностические трудности возникают и в тех случаях, когда имеется сочетание ЗКО с другими опухолями. В литературе описаны сочетания ЗКО с метастазирующей герминогенной опухолью яичка [1], раком молочной железы [34], лимфомой Ходжкина [35].
R. Cutlan и M. Eltorky [36] описали сочетание ЗКО и рака бронха. Такую возможность необходимо учитывать при оценке биологической сущности псевдоэпителиоматозной гиперплазии.
Мы наблюдали 13 пациентов с доброкачественными ЗКО верхних дыхательных путей. Возраст больных варьировал от 9 до 58 лет. Преобладали женщины (7 наблюдений). В 10 случаях опухоли локализовались в бронхах, в 2 — в трахее, в 1 — в гортани. В 1 случае наблюдался мультицентрический рост, в 2 — рецидивы. Так, у больной 9 лет при локализации опухоли в гортани рецидив наблюдался через 1 год после удаления первичного узла, у больной 47 лет опухоль 6-го правого сегментарного бронха рецидивировала через 2 года после удаления первичного узла.
Клинические симптомы опухоли зависели от ее локализации и размера. Наиболее часто больные жаловались на одышку и приступы удушья, которые расценивались как бронхиальная астма, а также на сухой кашель; при обтурации просвета бронха развивалась пневмония. В 2 случаях больные не предъявляли никаких жалоб, а опухоль была обнаружена при профилактическом осмотре.
На рентгенограммах в легочном поле имелась гомогенная тень округлой или овальной формы с четким наружным контуром, суживавшая просвет трахеи или бронха. В 2 случаях отмечалась гиповентиляция легочной ткани дистальнее образования, у 1 больного — ателектаз нижней доли.
При бронхоскопическом исследовании обнаруживался, как правило, эндобронхиальный рост опухоли на неизмененной слизистой оболочке или на фоне ее гиперемии с инфильтрацией стенки бронха. Опухоль имела вид полипа с гладкой поверхностью на широком основании или плоской бляшки и состояла из мягкой, рыхлой ткани желтовато-розового или серого цвета разных оттенков. Слизистая оболочка над опухолью была интактна или локально изъязвлена и кровоточила. Некоторые опухоли располагались в толще стенки бронха. В 1 случае на поверхности новообразования имелись некротические массы. У 2 больных отмечалось частичное нарушение проходимости бронха или трахеи.
На основании результатов рентгенологического исследования и бронхоскопии в 8 наблюдениях было диагностировано доброкачественное новообразование, у 5 больных — рак бронха.
У 10 больных опухоль была удалена эндоскопически, в 3 случаях выполнена лобэктомия.
Биопсийный и операционный материал подвергался гистологическому и иммуногистохимическому исследованию после фиксации в 10% нейтральном формалине, проводки в спиртах восходящей концентрации и заливки в парафин. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином и по ван Гизону. Кроме того, в ряде случаев проводились окраска суданом III, альциановым синим, ШИК-реакция и иммуногистохимическое исследование с антителами к протеину S-100, виментину, нейроспецифической енолазе. Пролиферативную активность опухолевых клеток оценивали с помощью маркера Ki-67.
Результаты микроскопического исследования свидетельствовали о том, что опухоль состоит из крупных полигональных или удлиненных клеток с бледно-эозинофильной зернистой цитоплазмой с мелкими эксцентрично расположенными ядрами. Опухолевые клетки инфильтрировали стенку и располагались между железами подслизистой оболочки, иногда вблизи хрящевых пластинок. В некоторых случаях обнаруживалась плоскоклеточная метаплазия мерцательного эпителия в месте расположения опухоли типа псевдоэпителиоматозной гиперплазии. Зерна в цитоплазме опухолевых клеток окрашивались альциановым синим, были ШИК-позитивными. Иммуногистохимическое исследование с антителами к протеину S-100, виментину и нейроспецифической енолазе выявило позитивное окрашивание цитоплазмы и ядер клеток диффузного характера. Пролиферативная активность опухолевых клеток была крайне низкой (менее 1% меченых клеток по Ki-67 индексу). Фигуры митозов не определялись.
Приводим результаты собственного наблюдения рецидивирующей ЗКО.
Больной Л., 47 лет, 01.02.2006 при биопсии в НИИ пульмонологии был поставлен гистологический диагноз ЗКО и выполнена лазерная фотодеструкция опухоли. При компьютерной томографии с последующим пересмотром изображения в условиях высокого разрешения на серии контрольных снимков грудной полости до ноября 2007 г. очаговые или полостные изменения не определялись. 10.12.2007 больная поступила в НИИ пульмонологии ГМУ им. И.П. Павлова с жалобами на постоянный кашель и субфебрилитет (температура тела 37,3 °С). При обследовании выявлен рецидив ЗКО в 6-м сегментарном бронхе правого легкого. 13.12.2007 выполнено оперативное вмешательство — клиновидная резекция главного бронха и удаление нижней доли правого легкого. В устье 6-го сегментарного бронха выявлено образование округлой формы диаметром 1,2 см серовато-белого цвета, обтурировавшее просвет бронха; нижняя доля правого легкого ателектатичная, плотная.
Лимфатические узлы увеличены, мягкие, на разрезе черного цвета. Удаленная опухоль диагностирована как ЗКО. Имелись крупные полигональные клетки с обильной зернистой эозинофильной цитоплазмой, расположенные в виде широких тяжей (рис. 1), 
Рисунок 1. Зернисто-клеточная опухоль бронха. а — общий вид опухоли. ×80; б — крупные клетки с зернистой цитоплазмой. ×600; в — лентовидные структуры в опухоли. ×600; г — плоскоклеточная метаплазия бронхиального эпителия. ×600. Окраска гематоксилином и эозином. покровный эпителий метаплазирован в многослойный плоский. Соединительнотканная строма опухоли развита слабо, содержала сосуды капиллярного типа. При иммуногистохимическом исследовании с антителами к протеину S-100, виментину и нейроспецифической енолазе выявлено диффузное позитивное окрашивание цитоплазмы и ядер клеток (рис. 2). 
Рисунок 2. Иммуногистохимическое исследование ЗКО. а — экспрессия протеина S-100 в клетках опухоли; б — экспрессия нейроспецифической енолазы в клетках опухоли; в — экспрессия виментина в клетках опухоли.
Обсуждение
Наши наблюдения подтверждают имеющиеся в литературе данные о морфологических особенностях и иммуногистохимическом фенотипе ЗКО, локализующихся в верхних дыхательных путях. Описанные нами за последние несколько лет 13 случаев, по-видимому, отражают общую тенденцию к увеличению интереса к этим своеобразным, редко встречающимся новообразованиям. Об этом можно судить по тому, что за 50 лет, прошедших со времени первого описания этих опухолей А.И. Абрикосовым, к 1970 г. было опубликовано 34 случая, к 1976 г. — 44 случая, а к 1995 г. — уже 100 случаев [37].
В аспекте сравнительной патологии опухолей интересно отметить, что ЗКО довольно часто встречается у лошадей, что нашло отражение в литературе по ветеринарной патологической анатомии [37].
Полученные сведения в известной мере отразились на трактовке некоторых важных вопросов этой патологии и в первую очередь на представлениях о ее гистогенезе.
Современная онкоморфология благодаря иммуногистохимическим методам опровергла точку зрения А.И. Абрикосова, считавшего, что источником происхождения ЗКО являются рабдомиобласты. Как и во всех других случаях, внешнее сходство опухолевых клеток ЗКО с миобластами является последним аргументом в пользу того, что ЗКО развивается из эмбриональных мышечных волокон. Тем не менее заслуга А.И. Абрикосова в детальном гистологическом описании этих новообразований не умаляется: ЗКО часто называют опухолью Абрикосова не только отечественные, но и зарубежные авторы.
Выйдя за пределы группы миогенных опухолей, ЗКО долго пребывала среди новообразований спорного и неясного гистогенеза. В качестве ее тканевых источников стали рассматривать не эмбриональные, а зрелые мышечные волокна, или гистиоциты, шванновские клетки, эндоневрию [38]. Иммуногистохимические исследования, обнаружившие, что бóльшая часть клеток ЗКО экспрессирует протеин S-100, склоняют к тому, что ЗКО имеют нейрогенную природу; у них есть связь со шванновскими клетками и в настоящее время они находятся в группе опухолей, происходящих из нервной ткани [39—41]. Мысль о связи клеток ЗКО со шванновскими клетками была высказана F. Feyrter [42] в те годы, когда иммуногистохимии еще не существовало. Кроме того, при иммуногистохимическом исследовании обнаружилось, что основной клеточный массив ЗКО экспрессирует нейроспецифическую енолазу, что также свидетельствует в пользу генетической близости ЗКО и шванном.
К такому же заключению склоняются Р. LeBoit и соавт. [43], описавшие 7 необычных ЗКО кожи, которые исключают их происхождение из шванновских клеток. Чтобы подчеркнуть это обстоятельство, авторы предложили называть эти опухоли «примитивными полипоидными ЗКО», полагая, что к этому обязывают особенности дифференцировки и поведения этих опухолей. R. Rosso и соавт. [44] наблюдали развитие ЗКО в местах предшествовавшей травмы, например в рубцах после мастэктомии по поводу рака молочной железы. Эти «опухоли» экспрессировали протеин S-100, нейроспецифическую енолазу, виментин и СD68 антиген. Авторы полагают, что клетки таких «опухолей» — гистиоцитарного происхождения и представляют собой элементы реактивного воспаления в оболочках периферических нервов. Такие пролиферативные реакции в периферических нервах напоминают как ЗКО, так и травматические невромы.
В зарубежной онкоморфологии намечается тенденция к отказу от гистогенетического принципа классификации опухолей [12]. При этом новые классификации основаны на принципе «направленности дифференцировки» опухолевых клеток или принципе сопоставления опухолевых клеток с их нормальными клеточными аналогами без уточнения клеточного источника новообразования.
С таким подходом вряд ли следует соглашаться, учитывая принципы эволюционной гистологии, разработанные Н.Г. Хлопиным, М.Ф. Глазуновым, В.Г. Гаршиным и другими отечественными патологами.
Нельзя не учитывать, что направление дифференцировки подчиняется определенным закономерностям и отражает исторически обусловленную гистологическую детерминацию. При опухолевом росте наблюдается дедифференцировка тканей, т.е. упрощение и утрата специфических морфологических особенностей. Это не означает, что малодифференцированные клетки разного происхождения делаются биологически тождественными во всех отношениях, а лишь свидетельствует, что при данных условиях роста опухоли не может осуществляться способность нормальных тканей дифференцироваться специфически. Иными словами, в этих условиях опухолевые клетки не обнаруживают своих гистобластических свойств и пребывают не в гистотипическом, а в цитотипическом состоянии, проявляя лишь свои элементарные цитобластические свойства (клеточные, а не тканевые).
Формальное сходство опухоли с той или иной тканью не свидетельствует об их родстве, тогда как отсутствие сходства такого родства не исключает. Иными словами, если опухолевый рост начался и продолжается, гистологическая структура не дает указаний относительно исходной тканевой структуры [38]. То же самое касается и иммуногистохимического фенотипа опухоли, экспрессии опухолевых маркеров и их нормальных аналогов.
Очевидно, в таком аспекте разнообразие мнений относительно генеза ЗКО не случайно. Сопоставление наших данных, касающихся ЗКО дыхательных путей, с описаниями ЗКО других локализаций, и прежде всего локализации в языке, показывает, что формы зернистых клеток в опухолях различной локализации не являются тождественными. Например, в языке зернистые клетки своими очертаниями больше напоминают поперечнополосатые мышечные волокна, чем в гортани и бронхах. Аналогичной точки зрения придерживался Д.И. Головин [38].
В связи с этим нам представляется, что вопрос о месте ЗКО в классификации опухолей нельзя считать решенным и закрепить за ними постоянное место в группе опухолей нервной системы, как это делают зарубежные авторы. Эти опухоли должны оставаться в группе опухолей неясного гистогенеза, к чему обязывает осторожность при решении вопросов гистогенеза. Как справедливо полагал Д.И. Головин [38], при более строгом подходе с учетом всех сомнений и споров об опухолях, «гистогенез которых, казалось бы, установлен, эту группу нужно было бы значительно расширить».
Более строгий подход должен учитывать принципиально новые критерии для решения проблем гистогенеза, выдвинутые М.Ф. Глазуновым [45]. Он полагал, что определение гистогенеза — задача не морфологического, а комплексного исследования, в которое включен ряд клинических данных о гормональной активности, эффективности химиотерапии, радиочувствительности той или иной опухоли. Этими клиническими данными в отношении ЗКО мы не располагаем, а результаты новых иммуногистохимических исследований этого пробела не восполняют.
Заключение
ЗКО верхних дыхательных путей имеют в сущности те же гистологические и иммуногистохимические особенности, что и ЗКО другой локализации. В настоящее время существует ряд оснований для того, чтобы считать их опухолями нейрогенной природы, близким к шванномам. Ввиду этого они нашли свою нишу в группе опухолей нервной ткани (ICD-O code 9580/O).
Однако нельзя не учитывать морфологические и иммуногистохимические доводы в пользу того, что ЗКО обнаруживают цитотипические, а не гистотипические свойства. В такой ситуации корректный подход к гистогенетической классификации этих опухолей должен учитывать критерии эволюционной гистологии, разработанные отечественными гистологами и гистопатологами и совершенно не известные зарубежным исследователям. Эти опухоли должны оставаться в группе опухолей неясного гистогенеза, поскольку вопрос об их месте в классификации опухолей остается открытым.