Антитела к цитоплазме нейтрофилов – это аутоантитела, направленные к ряду ферментов, содержащихся в первичных гранулах цитоплазмы нейтрофилов и связанные с нейтрофилопосредованным воспалением.
Синонимыанглийские
Antineutrophil cytoplasmic antibody, ANCA IgG; cytoplasmic ANCA (cANCA), perinuclear ANCA (pANCA).
Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) класса IgG представляют собой аутоантитела, которые направлены к белкам азурофильных гранул, содержащихся в цитоплазме нейтрофилов. Известно несколько ферментов – антигенных мишеней АНЦА: протеиназа-3, миелопероксидаза, лактоферрин, катепсин G, эластаза и другие. Выявление АНЦА используется в диагностике системных гранулематозных васкулитов, воспалительных заболеваний кишечника, некоторых аутоиммунных заболеваний печени, при ревматической патологии.
Реакция непрямой иммунофлюоресценции является «золотым» стандартом выявления АНЦА. В качестве субстрата реакции используются нейтрофилы, фиксированные с помощью этанола. Данный метод позволяет выделить два основных типа свечения АНЦА: цитоплазматический тип (цАНЦА) и перинуклеарный тип (пАНЦА) в зависимости от вида антигенных мишеней, с которыми связываются данные аутоантитела.
Основным антигеном при цАНЦА является фермент из группы сериновых протеаз – протеиназа-3, являющийся диагностическим маркером гранулематоза Вегенера. Гранулематоз Вегенера – системное аутоиммунное заболевание с повреждением сосудов мелкого и среднего калибра, формированием некротических гранулем, характеризуется прогрессирующим течением. В патологический процесс вовлекаются органы верхних дыхательных путей, легкие и почки. Верхние дыхательные пути поражаются в 90 % при данном заболевании и проявляются ринитом, синуситом, носовыми кровотечениями, перфорацией носовой перегородки. В легких формируются инфильтраты, полости, в последующем может возникать легочная недостаточность. Поражение почек проявляется гломерулонефритом с протеинурией, гематурией, формированием быстро прогрессирующей почечной недостаточности. Помимо основных симптомов, для гранулематоза Вегенера характерны следующие проявления: миалгии, артралгии, утомляемость, лихорадка, потливость, средний отит с развитием потери слуха, поражение глаз (кератит, эписклерит), поражение кожи (пурпура, язвы, синдром Рейно), повреждение сердца.
Для АНЦА известно несколько антигенных мишеней: миелопероксидаза, лактоферрин, эластаза, катепсин G, лизоцим, азуроцидин, белок BPI. Антитела, ассоциированные с ферментом миелопероксидазой, в 70 % случаев встречаются при синдроме Чарга – Стросс и в 40-50 % случаев при микроскопическом полиангиите. Эти заболевания являются системными васкулитами с преимущественным поражением почек, а также кожи, суставов, желудочно-кишечного тракта и проявляются слабостью, лихорадкой, потерей веса. Для синдрома Чарга – Стросс, в отличие от микроскопического полиангиита, характерно поражение легочной ткани.
Существуют также редко встречающиеся атипичные формы АНЦА, которые могут быть обнаружены при аутоиммунном гепатите, первичном билиарном циррозе, первичном склерозирующем холангите, неспецифическом язвенном колите, болезни Крона, ревматоидном артрите.
Поэтому выявление АНЦА класса IgG с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции рекомендуется использовать в качестве базового скринингового теста. Далее при определении конкретной антигенной мишени АНЦА следует использовать тесты, позволяющие определять их количественное или полуколичественное содержание, в частности определение антител к миелопероксидазе и протеиназе-3, к панели антигенов цитоплазмы нейтрофилов. Также рекомендуется отличать различные типы свечения АНЦА IgG от свечения антинуклерного фактора, дополняя тестирование АНФ на HEp-2 клетках.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Титр: Что может влиять на результат?
Выявление АНЦА класса IgG с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции рекомендуется использовать в качестве базового скринингового теста. Далее при определении конкретной антигенной мишени АНЦА следует использовать тесты, позволяющие определять их количественное или полуколичественное содержание, а также дополнить тест определением АНФ на клетках Нер-2.
22 Антинуклеарный фактор на HEp-2 клетках
52 Антитела к миелопероксидазе (анти-МРО)
30 Антитела к протеиназе-3 (анти-PR-3)
13 Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
21 Лейкоцитарная формула
6 Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
18 Антитела к клеткам сосудистого эндотелия (HUVEC)
17 Антитела к С1q фактору комплемента
22 Антитела к гладким мышцам
16 Антитела к микросомальной фракции печени и почек (анти-LKM)
Сайт носит информационный характер и не является публичной офертой. Стоимость товаров/услуг, их наличие и подробные характеристики уточняйте у представителей (администраторов) медицинского центра, используя средства связи, указанные на Сайте.
Получить результаты Компания «Новые Медицинские Технологии»
Диагностика аутоиммунных заболеваний и синдромов
Показания к назначению анализа: диагностика и дифференциальная диагностика системных заболеваний соединительной ткани (особенно СКВ), аутоиммунного гепатита, вирусного гепатита с аутоиммунным компонентом (индуцированным вирусами или лечебными вмешательствами), первичного билиарного цирроза, рассеянного склероза; выявление аутоиммунного компонента при различных заболеваниях, в патогенезе которых может играть роль аутоагрессия. Материал для исследования: сыворотка крови.
Для определения антинуклеарных антител используется методика непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата клеток культивируемой линии Нер-2.
Использование в качестве субстрата клеток злокачественной культивируемой линии благодаря их особенностям (высокое ядерно-цитоплазматическое соотношение, крупные размеры, наличие большого количества митозов) позволяет оценить различные типы свечения, характерные для присутствия в образце крови широкого спектра антител к различным антигенам, имеющих различные клинические ассоциации. Следует иметь в виду, что часть из определяемых типов свечения является высокоспецифичной, четко ассоциирована с определенными заболеваниями и имеет вполне определенную диагностическую значимость, в особенности при выявлении в высоких титрах; однако некоторые антитела к различным антигенам могут давать сходные типы свечения, в таких случаях может требоваться дальнейшее обследование для уточнения конкретного антигена, к которому направлены аутоантитела. С другой стороны, определенный тип антител может встречаться при нескольких нозологических формах. Существуют также антитела (они встречаются редко), реагирующие исключительно с компонентами веретенного аппарата клеток; обычно они не связаны с аутоиммунными заболеваниями, и их обнаружение расценивается как ложнопозитивный, не имеющий клинических ассоциаций результат.
Все вышеперечисленные особенности обязательно отражаются в лабораторном заключении, где, помимо указания типа свечения и соответствующего ему наиболее вероятного типа антител, даются также рекомендации по трактовке результатов в смысле возможной ассоциации с конкретными нозоформами или синдромами, а также необходимые дополнительные лабораторные исследования.
ТРАКТОВКА РЕЗУЛЬТАТОВ.
У здоровых лиц моложе 60 лет следует ожидать отрицательных результатов на антитела к компонентам ядра и цитоплазмы; в низком титре (слабоположительный результат) эти антитела все же обнаруживаются у 2-3% (по некоторым данным, до 10%) практически здоровых людей, однако никогда нельзя предсказать, не разовьется ли у этих людей аутоиммунное заболевание в будущем (так, по данным некоторых авторов, антитела к ДНК начинают выявляться задолго до начала клинических проявлений СКВ, латентный период может продолжаться годами). После 60 лет частота слабоположительных результатов с возрастом постоянно растет. Клиническая значимость этих результатов остается неясной; как правило, они выявляются только в первичном (скрининговом) разведении 1:40. Исходя из этого, при выявлении положительного результата в скрининговом титре 1:40 всегда необходимо титрование, как минимум до диагностического титра 1:80. В любом случае представляется целесообразным последующее регулярное клинико-лабораторное наблюдение лиц, у которых выявлены ANA в низком титре.
ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА Положительный результат предполагает наличие определенных заболеваний (см. ниже), однако, как и результат любых лабораторных исследований, может нуждаться в подтверждении или уточнении с помощью других методов, а также в установлении клинико-лабораторных корреляций. Надо иметь в виду, что различные лекарственные препараты могут вызывать образование аутоантител (гидралазин, прокаинамид, фенитоин, карбамазепин, изониазид, хлорпромазин, пеницилламин, леводофа, пенициллин, фенилбутазон, пероральные контрацептивы, хинидин). Наиболее частыми мишенями для этих ятрогенных аутоантител являются ядерные гистоны, что приводит к развитию гомогенного или гомогенного периферического типа свечения.
Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.
Метод исследования с использованием человеческих эпителиальных клеток HEp-2, который позволяет обнаружить антинуклеарные антитела – один из маркеров системных заболеваний соединительной ткани.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Определение антинуклеарного фактора (АНФ) является «золотым стандартом» выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний.
Патогенез системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) тесно связан с нарушениями в иммунной системе и повышенной выработкой антител к структурам собственных клеток. Аутоантитела к компонентам ядра клеток – антинуклеарные антитела – взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и белками ядра, антигенами цитоплазмы, что проявляется воспалительными изменениями в тканях и органах, болями в суставах и мышцах, выраженным утомлением, потерей веса, кожными изменениями. АНА обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). АНА встречаются более чем у 90 % больных системными заболеваниями соединительной ткани, в настоящее время описано около 200 разновидностей, которые объединены единым названием – антинуклеарный фактор.
При определении АНФ методом непрямой флюоресценции чаще используется перевиваемая линия эпителиальных клеток аденокарциномы гортани человека НЕр-2. Клетки НЕр-2 являются очень удобным субстратом для лабораторного исследования, так как обладают крупными ядрами и на стеклах растут в один слой. АНА выявляются при связывании с внутриклеточными антигенами клеток НЕр-2.
При исследовании эпителиальные клетки НЕр-2 выращивают на стеклах, фиксируют и инкубируют с разведенной сывороткой крови пациента. После удаления избытка сыворотки клетки инкубируют с меченными флюоресцеином антителами, затем снова промывают и исследуют с помощью флюоресцентного микроскопа. При этом определяется титр антител и тип свечения. Диагностически значимым считается титр более 1:160. При обострении ревматических заболеваний он превышает 1:640, а в период ремиссии снижается до 1:160-1:320. Чем больше антител, тем выше титр. По типу свечения можно установить мишени антинуклеарных антител, что имеет важное клиническое значение и определяет тактику дальнейшего обследования пациента. Основными являются периферический, гранулярный (мелко-/крупно-), ядрышковый, центромерный и цитоплазматический типы окрашивания ядра. Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.
Гомогенное (диффузное) окрашивание связано с наличием антител к двуспиральной ДНК, гистонам и характерно для СКВ и лекарственной волчанки.
Периферическое свечение обусловлено периферическим распределением хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ. Данный тип свечения важно дифференцировать от окрашивания ядерной мембраны, которое происходит при аутоиммунных заболеваниях печени.
Гранулярное (крапчатое, сетчатое) окрашивание встречается наиболее часто и является наименее специфичным, выявляется при многих аутоиммунных заболеваниях. Аутоантигенами в данном случае выступают нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B антигены и PCNA).
Очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения часто указывают на смешанное заболевание соединительной ткани.
Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание обусловлено антителообразованием к компонентам ядрышка (PHК-полимераза-1, NOR, U3RNP, PM/Scl), выявляется при склеродермии, болезни Шегрена. АНА иногда повышаются при эндокринных заболеваниях (сахарном диабете 1-го типа, тиреоидите, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), кожных заболеваниях (псориазе, пузырчатке), при беременности, после трансплантации органов и тканей, у больных на гемодиализе.
Центромерное свечение появляется при наличии антител к центромерам хромосом и характерно для формы склеродермии – CREST-синдрома.
Цитоплазматический тип свечения связан с антителами к тРНК-синтетазе, в частности к Jo-1, что характерно для дерматомиозита и полимиозита. Данный тип окрашивания также определяется при наличии антител к другим компонентам цитоплазмы при аутоиммунном гепатите, первичном билиарном циррозе.
Одновременное выявление различных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.
У здоровых людей может быть обнаружено мелкогранулярное свечение при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме крупнозернистые или гомогенные типы свечения не должны определяться.
В зависимости от результатов оценки типа свечения разрабатывается дальнейшая тактика лечения пациента и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Титр: Причины повышения титра АНФ на HEp-2 клетках:
Тип свечения
Для чего он характерен
Для СКВ, лекарственной волчанки, системной склеродермии, хронического активного гепатита
Для СКВ, синдрома Шегрена, смешанной болезни соединительной ткани, ревматоидного артрита
Для полимиозита/дерматомиозита, склеродермии, синдрома Шегрена, СКВ
Для CREST-синдрома (кальциноза кожи, синдрома Рейно, эзофагеальной дисфункции, склеродактилии, телеангиоэктазии)
Для дерматомиозита/полимиозита, аутоиммунного заболевания печени, первичного билиарного цирроза
Атипичные клетки – это такие клетки, которые под воздействием различных неблагоприятных факторов из обычной нормальной клетки человеческого организма преобразовались в нехарактерную структуру, изменили свой размер и форму. Организм в свою очередь теряет контроль над такими клетками, поэтому существует риск перерождения атипических клеток, что может привести к образованию рака.
Что может повлиять на образование атипичных клеток:
Это некоторые факторы, которые могут привести к образованию атипичных клеток. К сожалению, точной причины их возникновения сказать никто не может. Даже какой-то незначительный сбой в организме может привести к возникновению не одной и даже не двух таких клеток, а тысяч.
Как происходит перерождение атипичных клеток в рак
Давно известно, что образование клеток с измененной ДНК появляются постоянно. Но появление атипичных клеток не всегда приводят к раку. В нашем организме есть защитный механизм, процесс старение и уничтожение клеток, так называемый апоптоз. Он отвечает за то, чтобы аномальные клетки исчезали из организма. Но любая система может дать сбой, и в результате атипичные клетки затаятся в организме. При таком раскладе есть вероятность их перерождения в раковые клетки.
Что делать, если обнаружили атипичные клетки во время биопсии? Рак это или нет?
В такой ситуации лучше перестраховаться, чем что-то пропустить. Ведь ранняя диагностика рака может спасти вам жизнь.
Иногда врач назначает какое-то конкретное лечение, чтобы постараться остановить образование атипичных клеток. Либо может понадобиться еще один образец ткани – дополнительная биопсия, чтобы быть уверенным в отсутствии рака или какого-то другого заболевания.
