Что означает чувствительный к антибиотикам
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ:
МЕТОДЫ, РЕЗУЛЬТАТЫ, ОЦЕНКА
Решедько Галина Константиновна,
к.м.н., ассистент кафедры клинической фармакологии
Смоленской государственной медицинской академии
214019, г.Смоленск, ул.Крупской, 28, а/я № 5.
Тел.: +7(0812) 61 13 01, 61 13 27, Факс: (0812) 61 12 94,
E-Mail: galina@antibiotic.ru
Содержание
Резюме
В лекции рассмотрены основные методы определения чувствительности in vitro микроорганизмов к антимикробным препаратам (диско-диффузионный, Е-тестов, методы разведения). Отражены подходы к эмпирическому и этиотропному назначению антибиотиков в клинической практике. Обсуждены вопросы интерпретации результатов определения чувствительности с клинической и микробиологической точек зрения.
В настоящее время в клинической практике существуют два принципа назначения антибактериальных препаратов: эмпирическое и этиотропное. Эмпирическое назначение антибиотиков основано на знаниях о природной чувствительности бактерий, эпидемиологических данных о резистентности микроорганизмов в регионе или стационаре, а также результатах контролируемых клинических исследований. Несомненным преимуществом эмпирического назначения химиопрепаратов является возможность быстрого начала терапии. Кроме того, при таком подходе исключаются затраты на проведение дополнительных исследований.
|
Однако при неэффективности проводимой антибактериальной терапии, при нозокомиальных инфекциях, когда затруднительно предположить возбудителя и его чувствительность к антибиотикам стремятся проводить этиотропную терапию. Этиотропное назначение антибиотиков предполагает не только выделение возбудителя инфекции из клинического материала, но и определение его чувствительности к антибиотикам. Получение корректных данных возможно только при грамотном выполнении всех звеньев бактериологического исследования: от взятия клинического материала, транспортировки его в бактериологическую лабораторию, идентификации возбудителя до определения его чувствительности к антибиотикам и интерпретации полученных результатов.
|
Методы определения чувствительности к антибиотикам
Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.
Рисунок 1. Определение чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом.
Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (рис. 2). В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).
Рисунок 2. Определение чувствительности микроорганизмов с помощью Е-тестов.
Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют диско-диффузионный метод.
Рисунок 3. Определение значения МПК методом разведения в жидкой питательной среде.
Интерпретация результатов определения чувствительности
На основании получаемых количественных данных (диаметра зоны подавления роста антибиотика или значения МПК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные (рис. 4). Для разграничения этих трех категорий чувствительности (или резистентности) между собой используют так называемые пограничные концентрации (breakpoint) антибиотика (или пограничные значения диаметра зоны подавления роста микроорганизма).
Рисунок 4. Интерпретация результатов определения чувствительности бактерий в соответствии со значениями МПК.
Существуют два подхода к интерпретации результатов определения чувствительности: микробиологический и клинический. Микробиологическая интерпретация основана на анализе распределения значений концентраций антибиотика, подавляющих жизнеспособность бактерий. Клиническая интерпретация основана на оценке эффективности антибактериальной терапии.
Чувствительные микроорганизмы (susceptible)
Клинически к чувствительным относят бактерии (с учетом параметров, полученных in vitro), если при лечении стандартными дозами антибиотика инфекций, вызываемых этими микроорганизмами, наблюдают хороший терапевтический эффект.
При отсутствии достоверной клинической информации подразделение на категории чувствительности базируется на совместном учете данных, полученных in vitro, и фармакокинетики, т.е. на концентрациях антибиотика, достижимых в месте инфекции (или в сыворотке крови).
Резистентные микроорганизмы (resistant)
К резистентным (устойчивым) относят бактерии, когда при лечении инфекции, вызванной этими микроорганизмами, нет эффекта от терапии даже при использовании максимальных доз антибиотика. Такие микроорганизмы имеют механизмы резистентности.
Микроорганизмы c промежуточной резистентностью (intermediate)
Клинически промежуточную резистентность у бактерий подразумевают в случае, если инфекция, вызванные такими штаммами, может иметь различный терапевтический исход. Однако лечение может быть успешным, если антибиотик используется в дозировке, превышающей стандартную, или инфекция локализуется в месте, где антибактериальный препарат накапливается в высоких концентрациях.
С микробиологической точки зрения к бактериям с промежуточной резистентностью относят субпопуляцию, находящуюся в соответствии со значениями МПК или диаметра зон, между чувствительными и резистентными микроорганизмами. Иногда штаммы с промежуточной резистентностью и резистентные бактерии объединяют в одну категорию резистентных микроорганизмов.
Необходимо отметить, что клиническая интерпретация чувствительности бактерий к антибиотикам является условной, поскольку исход терапии не всегда зависит только от активности антибактериального препарата против возбудителя. Клиницистам известны случаи, когда при резистентности микроорганизмов, по данным исследования in vitro, получали хороший клинический эффект. И наоборот, при чувствительности возбудителя может наблюдаться неэффективность терапии.
В определенных клинических ситуациях, когда недостаточно результатов исследования чувствительности обычными методами, определяют минимальную бактерицидную концентрацию.
Значение МБК используют при терапии антибиотиками, обладающими бактериостатическим действием, или при отсутствии эффекта от антибактериальной терапии у особой категории больных. Частными случаями для определения МБК могут быть, например, бактериальный эндокардит, остеомиелит или генерализованные инфекции у пациентов с иммунодефицитными состояниями.
В заключение хотелось бы отметить, что на сегодняшний день не существует методов, которые позволили бы с абсолютной достоверностью прогнозировать клинический эффект антибиотиков при лечении инфекционных болезней. Однако, данные результатов определения чувствительности могут служить хорошим ориентиром клиницистам для выбора и коррекции антибактериальной терапии.
Таблица 1. Критерии интерпретации чувствительности бактерий
Когда «работает» не все: определение чувствительности к антибиотикам
Всемирная организация здравоохранения заявляет: «Устойчивость бактерий к антибиотикам возрастает до угрожающе высоких уровней во всем мире». В таких условиях даже «банальный» отит или тонзиллит может приобретать затяжное, осложненное течение, не говоря о риске в отношении потенциально летальных инфекций. Как выяснить какой препарат эффективен против «своей» патогенной флоры? И какой анализ выбрать?
«Классический» способ
Некоторые представители бактериальной флоры обладают поразительной способностью к мутациям. Бактерии, еще вчера чувствительные к простому пенициллину, сегодня – «не реагируют» на куда более «продвинутые» антибиотики.
Поэтому в современной медицине лечение бактериальных процессов без понимания особенностей возбудителя представляется «занятием» сомнительным и бесперспективным. В лучшем случае, воспаление просто «затихнет» на короткое время, а в худшем – разовьется до угрожающих жизни масштабов.
Особенно опасна такая ситуация в отношении хирургических больных, новорожденных и людей с ослабленным иммунитетом, а также тех, для кого прием антибиотиков стал нормой жизни.
Микробиологические способы идентификации возбудителей уже давно используются медициной всего мира, а современные анализаторы сделали этот процесс быстрее и эффективнее.
Так, посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам позволяет не только «узнать» бактерии, но и проверить их чувствительность к стандартному (6-8) или расширенному (до 12) спектру антибиотиков.
В результате будет указан не только вид бактерий, но и их количество и реакция на препарат:
Правда у анализа есть и недостатки:
Новое поколение
Потребность медицины в быстром и качественном микробиологическом исследовании «подтолкнула» науку к созданию метода MALDI-TOF MC, удостоенного Нобелевской премии в 2002 году.
Метод основан на идентификации уникального белкового состава бактерий, представляющего собой своего рода «отпечаток пальца». Его точность достигает 98%. А в анализатор заложена информация более чем о 750 видах клинически значимых микроорганизмах, с возможностью «обновления базы данных».
Кроме того, примененеие идентификации MALDI-TOF MC в составе комплексных исследований позволяет проверить чувствительность микрофлоры к 18-20 препаратам, против максимально-возможных 12 у предыдущих «поколениях» посевов. В результате анализа теперь можно увидеть не только эффективность антибиотика, но и подобрать по протоколу минимальную действующую дозу препарата.
Метод полностью автоматизирован, что исключает влияние человеческого фактора на результат. А готовность исследования составляет максимум 4 дня.
Анализ на чувствительность к антибиотикам
На сегодняшний день в медицине есть 3 метода определения чувствительности микробов к антибиотику:
По сути, вне зависимости от выбранного метода, анализ на чувствительность к антибиотикам сводится к выделению возбудителя болезни в чистой культуре с дальнейшим определением спектра чувствительности к тем или иным антибиотикам. Обязательно анализ на антибиотики делается с микроорганизмов, выделенных из первично стерильных жидкостей, органов и тканей человека (кровь, спинномозговая жидкость, моча, микрофлора влагалища и уретры).
В результате проведенного исследования составляется антибиотикограмма – это список антибиотиков, к которым чувствителен или не чувствителен исследуемый микроорганизм, единица измерения при этом – минимальное количество антибиотика, необходимое для уничтожения возбудителя болезни.
Все микробы подразделяются на 3 категории в зависимости от их устойчивости к антибиотикам:
В зависимости от результатов исследования на чувствительность к антибиотикам, врач назначает необходимые препараты, их дозы и продолжительность приема для оптимального лечения заболевания. Однако следует помнить, что чувствительность микробов «in vitro» (в пробирке) и «in vivo» (в живом организме) – это разные вещи. Здесь важно знать не то, какая концентрация микробов в пробирке с питательной средой, а их количество именно в пораженном органе. Сегодня технологии, с помощью которой можно было бы делать посев прямо из очагов болезни, нет, поэтому, несмотря на достаточно высокую точность анализов, следует помнить, что выявленная чувствительность к антибиотикам не всегда совпадает с реальностью, и на это должен сделать поправку врач, чтобы не допустить неэффективного приема пациентом антибиотиков.
Посев мочи на антибиотики
Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам делается из образцов изначально стерильных жидкостей. Остановимся на двух из них – моче и крови.
1. Анализ мочи на антибиотики – это метод, применяемый для диагностики инфекций в мочевыделительной системе человека, приводящих к возникновению цистита, уретрита, пиелонефрита, а также при диабете и дефиците иммунной системы.
Показания к проведению посева мочи:
Для анализа на чувствительность к антибиотикам необходимо собрать утреннюю порцию мочи в специальную стерильную емкость, выпустив первые и последние капельки. Руки и половые органы перед сбором мочи следует тщательно вымыть. При таком способе забора мочи в лабораторию попадет максимальная концентрация микроорганизмов в случае их наличия у пациента. Будьте внимательны, сообщите врачу, если в последние дни перед сдачей анализов Вы принимали антибиотики – это может дать ложноотрицательный результат исследования. Продолжительность исследования – от одного до десяти дней в зависимости от типа микробов. За это время образец мочи подвергает различным анализам, и в результате определяется возбудитель инфекции, а также уровень его чувствительности к тем или иным антибиотикам, что помогает врачу принять правильное решение о назначении препарата.
2.Анализ крови на антибиотики также призван дать ответ на вопрос, есть ли в крови пациента бактерии. Бактериемия, то есть зараженность крови микробами – очень опасное явление, с этим шутить не стоит. Забор крови происходит до начала приема антибиотиков, поскольку они могут вызвать неправильный отрицательный результат.
Кровь берут из вены при помощи одноразового катетера в количестве 5 – 10 мл, ее помещают в специальную стерильную бутыль с резиновой пробкой, в которой приготовлена питательная среда для бактерий. Обычно результат известен уже через 16 – 18 часов, однако в случае, если бактерии относятся к медленно растущим видам, тогда за образцом крови наблюдают несколько дней до момента, когда рост бактерий становится очевидным.
После того, как установлены типы микроорганизмов в крови пациента, начинается исследование их на устойчивость к антибиотикам. В окончательный результат записывают идентифицированные виды бактерий в крови, а также сведения об их устойчивости к антибиотикам.
Результаты бактериологического посева крови могут быть следующими:
На этом исследование крови на антибиотики заканчивается, результат передается врачу, и он принимает решение о назначении тех или иных антибиотиков для лечения выявленного заболевания.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ:
МЕТОДЫ, РЕЗУЛЬТАТЫ, ОЦЕНКА
Решедько Галина Константиновна,
к.м.н., ассистент кафедры клинической фармакологии
Смоленской государственной медицинской академии
214019, г.Смоленск, ул.Крупской, 28, а/я № 5.
Тел.: +7(0812) 61 13 01, 61 13 27, Факс: (0812) 61 12 94,
E-Mail: galina@antibiotic.ru
Содержание
Резюме
В лекции рассмотрены основные методы определения чувствительности in vitro микроорганизмов к антимикробным препаратам (диско-диффузионный, Е-тестов, методы разведения). Отражены подходы к эмпирическому и этиотропному назначению антибиотиков в клинической практике. Обсуждены вопросы интерпретации результатов определения чувствительности с клинической и микробиологической точек зрения.
В настоящее время в клинической практике существуют два принципа назначения антибактериальных препаратов: эмпирическое и этиотропное. Эмпирическое назначение антибиотиков основано на знаниях о природной чувствительности бактерий, эпидемиологических данных о резистентности микроорганизмов в регионе или стационаре, а также результатах контролируемых клинических исследований. Несомненным преимуществом эмпирического назначения химиопрепаратов является возможность быстрого начала терапии. Кроме того, при таком подходе исключаются затраты на проведение дополнительных исследований.
|
Однако при неэффективности проводимой антибактериальной терапии, при нозокомиальных инфекциях, когда затруднительно предположить возбудителя и его чувствительность к антибиотикам стремятся проводить этиотропную терапию. Этиотропное назначение антибиотиков предполагает не только выделение возбудителя инфекции из клинического материала, но и определение его чувствительности к антибиотикам. Получение корректных данных возможно только при грамотном выполнении всех звеньев бактериологического исследования: от взятия клинического материала, транспортировки его в бактериологическую лабораторию, идентификации возбудителя до определения его чувствительности к антибиотикам и интерпретации полученных результатов.
|
Методы определения чувствительности к антибиотикам
Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.
Рисунок 1. Определение чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом.
Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (рис. 2). В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).
Рисунок 2. Определение чувствительности микроорганизмов с помощью Е-тестов.
Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют диско-диффузионный метод.
Рисунок 3. Определение значения МПК методом разведения в жидкой питательной среде.
Интерпретация результатов определения чувствительности
На основании получаемых количественных данных (диаметра зоны подавления роста антибиотика или значения МПК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные (рис. 4). Для разграничения этих трех категорий чувствительности (или резистентности) между собой используют так называемые пограничные концентрации (breakpoint) антибиотика (или пограничные значения диаметра зоны подавления роста микроорганизма).
Рисунок 4. Интерпретация результатов определения чувствительности бактерий в соответствии со значениями МПК.
Существуют два подхода к интерпретации результатов определения чувствительности: микробиологический и клинический. Микробиологическая интерпретация основана на анализе распределения значений концентраций антибиотика, подавляющих жизнеспособность бактерий. Клиническая интерпретация основана на оценке эффективности антибактериальной терапии.
Чувствительные микроорганизмы (susceptible)
Клинически к чувствительным относят бактерии (с учетом параметров, полученных in vitro), если при лечении стандартными дозами антибиотика инфекций, вызываемых этими микроорганизмами, наблюдают хороший терапевтический эффект.
При отсутствии достоверной клинической информации подразделение на категории чувствительности базируется на совместном учете данных, полученных in vitro, и фармакокинетики, т.е. на концентрациях антибиотика, достижимых в месте инфекции (или в сыворотке крови).
Резистентные микроорганизмы (resistant)
К резистентным (устойчивым) относят бактерии, когда при лечении инфекции, вызванной этими микроорганизмами, нет эффекта от терапии даже при использовании максимальных доз антибиотика. Такие микроорганизмы имеют механизмы резистентности.
Микроорганизмы c промежуточной резистентностью (intermediate)
Клинически промежуточную резистентность у бактерий подразумевают в случае, если инфекция, вызванные такими штаммами, может иметь различный терапевтический исход. Однако лечение может быть успешным, если антибиотик используется в дозировке, превышающей стандартную, или инфекция локализуется в месте, где антибактериальный препарат накапливается в высоких концентрациях.
С микробиологической точки зрения к бактериям с промежуточной резистентностью относят субпопуляцию, находящуюся в соответствии со значениями МПК или диаметра зон, между чувствительными и резистентными микроорганизмами. Иногда штаммы с промежуточной резистентностью и резистентные бактерии объединяют в одну категорию резистентных микроорганизмов.
Необходимо отметить, что клиническая интерпретация чувствительности бактерий к антибиотикам является условной, поскольку исход терапии не всегда зависит только от активности антибактериального препарата против возбудителя. Клиницистам известны случаи, когда при резистентности микроорганизмов, по данным исследования in vitro, получали хороший клинический эффект. И наоборот, при чувствительности возбудителя может наблюдаться неэффективность терапии.
В определенных клинических ситуациях, когда недостаточно результатов исследования чувствительности обычными методами, определяют минимальную бактерицидную концентрацию.
Значение МБК используют при терапии антибиотиками, обладающими бактериостатическим действием, или при отсутствии эффекта от антибактериальной терапии у особой категории больных. Частными случаями для определения МБК могут быть, например, бактериальный эндокардит, остеомиелит или генерализованные инфекции у пациентов с иммунодефицитными состояниями.
В заключение хотелось бы отметить, что на сегодняшний день не существует методов, которые позволили бы с абсолютной достоверностью прогнозировать клинический эффект антибиотиков при лечении инфекционных болезней. Однако, данные результатов определения чувствительности могут служить хорошим ориентиром клиницистам для выбора и коррекции антибактериальной терапии.
Таблица 1. Критерии интерпретации чувствительности бактерий
Посев на микрофлору (идентификация агента и чувствительность к а/б)
Описание исследования
Посев отделяемого верхних дыхательных путей
Тестирование позволяет определить возбудителя инфекции и выбрать для лечения наиболее действенный антибиотик.
Достаточно часто причинами болезней верхних дыхательных путей (в частности, ринита или синусита (поражения носа), фарингита (слизистой оболочки горла)), является воздействие микроорганизмов:
Своевременная постановка диагноза с точным определением агента инфекции способствует проведению адекватного лечения, что в свою очередь, не позволяет перейти заболеванию из острой в хроническую форму.
Цель исследования – выявление микроорганизмов:
основных возбудителей инфекции, условно-патогенных бактерий:
представителей нормальной флоры:
Цель тестирования – выделение следующих возбудителей инфекции:
Посев раневого отделяемого и тканей
Результаты данного тестирования используются для назначения эффективного лечения ран с применением антибиотиков.
Часто сложные раны не лечатся должным образом, причиной чему во многих случаях является неправильное назначение антибиотиков.
Достаточно часто гнойно-воспалительные осложнения ран возникают из-за воздействия условно-патогенных бактерий. Однако еще более частыми возбудителями выступают бактерии, которые не нуждаются для нормальной жизнедеятельности в кислороде (частично или полностью). Общее название таких микроорганизмов – анаэробы. Осложнения ран вызывается некоторыми их представительями – грамотрицательными (неокрашиваемыми при проведении характерной реакции окрашивания по Граму) палочками, грамположительными (окрашиваемыми) кокками, не образующими спор палочками. При проявлении одинаковых симптомов осложнения и идентичности обнаруженных бактерий, реакция их на антибиотики у разных людей может иметь существенные различия.
Действенность лечения антибиотиками на данный момент оставляет желать лучшего. Однако точная идентификация микроорганизмов и определение их чувствительности к антибиотикам позволяет сделать процесс намного действеннее.
Цель исследования – выделение следующих возбудителей инфекции:
Важно. При отборе пробы необходимо иметь наготове транспортную среду.
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
Исследование проводится с целью выделения следующих возбудителей:
— золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus)
— эпидермиального стафилококка (Staphylococcus epidermidis) и некоторых других видов;
— пневмококков (Streptococcus pneumoniae);
— пиогенного стрептококка (Streptococcus pyogenes);
— стрептококка вириданс (Viridans streptococcus);
— кандиды (Candida) (чаще всего);
— кишечной палочки (Escherichia coli)
— нейссерии (Neisseria species);
— протея (Proteus vulgaris);
Посев отделяемого половых органов или соскоба из влагалища, цервикального канала, мочеиспускательного канала
Тест предназначен для идентификации бактерий, вызвавших неспецифическое инфекционно-воспалительное заболевание (т.е. когда агент инфекции, послуживший причиной его возникновения, не известен), и назначения по его результатам действенного лечения с применением антибиотиков.
В нормальном состоянии биоценоз (совокупность микроорганизмов, представляющих микрофлору) мочеполовой системы человека представлен более-менее постоянным, иногда зависящим от возраста, составом. Так, микрофлора влагалища женщин репродуктивного возраста в значительном количестве содержит строгие (облигатные – гибнущие при попадании в кислородную среду) и факультативные (которые могут существовать как с присутствием кислорода, так и без него) анаэробные организмы, большинство из которых – лактобациллы. В значительно меньшей мере его населяют аэробные (нуждающиеся для жизнедеятельности в нормальном содержании кислорода) и микроаэрофильные (которым достаточно сниженной концентрации кислорода) условно-патогенные бактерии. Во внутреннем канале шейки матки и в самой матке бактерии в нормальном состоянии отсутствуют.
Микрофлора девочек, не вступивших в фазу полового созревания, представлена кокками и дифтероидами (грамположительными палочками).
В ближних к наружному выходу отделах уретры (мочеиспускательного канала) здоровых мужчин могут присутствовать небольшие количества грамположительных палочек и кокков. В проксимальных (удаленных от выхода) отделах уретры, простате и семявыводящих канальцах в норме стерильно.
Если нарушается баланс между видами микроорганизмов и/или появляются несвойственные для данного места бактерии, это создает серьезную предпосылку для возникновения инфекционно-воспалительного процесса.
Болезни, характерные для женщин:
Болезни, часто встречающиеся у мужчин:
Результатом исследования является выделение условно-патогенных бактерий (т.е. тех, которые могут являться частью нормальной микрофлоры, но при ослаблении иммунитета становятся возбудителями заболеваний): энтеробактерий, стрептококков, стафилококков, гемофильных палочек, неферментирующих грамотрицательных бактерий, энтерококков, коринеформных бактерий, дрожжеподобных грибов (только констатируется факт их присутствия, виды не определяются).
Внимание! Исследование наличия специфических возбудителей – хламидий (Chlamydia trachomatis), влагалищной трихомонады (Trichomonas vaginalis), бледной спирохеты (Treponema pallidum), гонококка (Neisseria gonorrhoeae) в рамках данного теста не проводятся.
Посев отделяемого из уха
Данный тест предназначен для микробиологической диагностики гнойно-воспалительных заболеваний уха.
Гнойно-воспалительные процессы отличаются локализацией, их могут вызывать различные возбудители. По расположению очага болезни различают поражение:
Причиной заболеваний выступают следующие микроорганизмы:
Для быстрого выздоровления пациента, а также дл предотвращения перехода болезни из острой формы в хроническую, очень важно идентифицировать возбудитель и определить его чувствительность к антибиотикам.
Посев проводится для проверки наличия грамотрицательных бактерий, относящихся к семейству энтеробактерий (Enterobacteriaceae), синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa), стафилококков, стрептококков (S. pyogenes, S. pneumoniae, S. viridans), коринебактерий, дрожжеподобных грибов, гемофильной палочки (Haemophilus influenzae).
Посев пункционного материала
Целью посева является выделение следующих возбудителей:
Для исследования отбираются пробы:
Посев на анаэробную микрофлору
Цель исследования – обнаружить присутствие микроорганизмов, живущих и растущих без доступа кислорода, при гнойно-воспалительных процессах.
Анаэробные бактерии благополучно живут в организме человека, составляя значительную часть его микрофлоры. Однако определенные условия могут сделать их причиной гнойных воспалений.
Независимо от того, в какой части тела расположен очаг, действие анаэробов не отличаются разнообразием – это гниение и газообразование. Чаще всего мишенью микроорганизмов становятся органы, в которых они обитают, вследствие чего происходит поражение мочеполовой системы, желудочно-кишечного тракта, верхних дыхательных путей. Проведение точной диагностики является жизненно необходимым – только это поможет назначить адекватное лечение и обезвредить инфекцию, представляющую смертельную опасность для организма человека.
Инфекция возбуждается превотеллами, вейлонеллами, клостридиями, пропионобактериями, эубактериями, пептострептококками, актиномицетами, фузобактериями, гемеллами, бифидобактериями, бактероидами, порфиромонадами.
При обследовании проводится тестирование:
Подготовка к исследованию
Отделяемое (соскоб) верхних дыхательных путей
Отбирать материал рекомендуется до приема пищи и питья, полоскания и прочих лечебных манипуляций или через 2 часа (минимум) после еды и питья. Отбор пробы проводится до начала приема антибиотиков, антисептиков, грибковых препаратов. При назначении специфической антибактериальной химиотерапии материал отбирается до ее проведения или не ранее, чем через сутки после введения препарата.
Для хранения и транспортировки отделяемого верхних дыхательных путей используется стерильный медицинский контейнер. До доставки в лабораторию он должен храниться в холодильнике.
Подписывая контейнер, необходимо указать ФИО, дату рождения, дату отбора пробы и откуда она была взята.
Взятие соскоба с задней стенки глотки или полости носа производится специальным тампоном, который помещается затем в транспортную систему со средой Амиеса (перед отбором пробы из носа необходимо удалить сухие корочки).
Тестирование нужно проводить перед применением противомикробных препаратов. Порция желчи, отобранная при операции, наиболее соответствует требованиям, предъявляемым к качеству биоматериала.
Если есть подозрения, что воспаление спровоцировано Клостридией перфрингенс (Clostridium perfringens), бактероидами Фрагилис (Bacteroides fragilis), пептострептококками (Peptostreptococcus sp), то рекомендуется посев на анаэробную микрофлору с определением чувствительности возбудителей к антибиотикам.
Посев раневого отделяемого и тканей
Обследование проводится до начала лечения антибиотиками.
Если у пациента рана от укуса, глубокая угревая сыпь, паронихия (воспаление околоногтевого валика), некротический фасциит (поражение бактериями соединительной оболочки – фасции и подкожной клетчатки), пролежни, газовая гангрена, то перед данным тестированием рекомендуется провести предварительные обследования: посев на анаэробы (бактерии, полностью или частично не нуждающиеся в кислороде) и бактериоскопия мазка на стекле.
При проведении обследования необходимо выполнять следующие требования:
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
Отбор отделяемого для исследования производит лечащий врач или сам пациент. Обследование назначается до приема антибиотиков.
Соскоб отбирается с конъюнктивы глаза, с переходной складки при вывернутом верхнем или нижнем веке. Для этого используется специальный тампон, который после отбора пробы помещается в емкость с транспортной средой. При проведении специфической антибактериальной химиотерапии проба отбирается до ее начала или через сутки после введения препарата.
В рамках данного теста не исследуется наличие вирусов и хламидий.
Посев отделяемого половых органов
Проведение обследования на фоне приема антибиотиков не информативно. Материал отбирается до его начала или через полторы-две недели после окончания лечения антибактериальными препаратами или иммуномодуляторами.
Нецелесообразно проводить обследование женщин во время менструации, так как количество микроорганизмов в этот период значительно меньшее, чем обычно. Биоматериал отбирается, начиная с 5-7 дня от начала цикла.
Перед проведением тестирования:
Обследование не проводится после инструментального, мануального, ультразвукового исследований, физиопроцедур, кольпоскопии и прочих манипуляций.
У мужчин исследуется эякулят (сперма). Биоматериал собирается в контейнер с крышкой. Для сбора эякулята не используются:
Это объясняется тем, что вещества, в них присутствующие (используемые при производстве презервативов или оставшиеся в контейнере после дезинфекции) могут повлиять на результат обследования.
До доставки в лабораторию, контейнер с образцом хранится в холодильнике при температуре от +2 до +8⁰С, но не более 10-12 часов. Охлажденный эякулят должен быть доставлен для исследования в день сбора (в качестве «холодильника» при транспортировке может быть использован термос с небольшим количеством льда или пакет с охлаждающими элементами).
Соскоб из мочевого канала (уретры) обирается через 1,5-2 часа после мочеиспускания или перед ним. Отбор пробы рекомендуется проводить до начала специфической антибактериальной химиотерапии или не менее чем через сутки после последнего введения лекарственного средства.
Посев отделяемого из уха; посев пункционного материала
Исследование не целесообразно проводить на фоне лечения антибиотиками, применения антисептиков и противогрибковых средств.
Материал для посева собирается только в стерильные контейнеры.
Транспортные среды перед использованием хранятся в холодильнике. Они подогреваются до комнатной температуры за полчаса до применения. Для каждого вида исследования предназначена особая транспортная среда.
Контейнер (или пробирка) с биоматериалом обязательно подписывается. Необходимо указать фамилию и инициалы пациента, дату рождения, дату, время сбора материала, и откуда взята проба.
Хранение отобранного материала должно производиться согласно требованиям, предъявляемым к режиму и срокам.
Посев на анаэробную микрофлору
Обследование не рекомендуется проводить на фоне антибактериальной терапии.
Посев на аэробные микроорганизмы целесообразно проводить параллельно с посевами на микрофлору в условиях отсутствия кислорода и проведением микроскопического исследования мазка, сделанного отдельным стерильным тампоном на стекле. На бланке направления обязательно делается запись, если исследование предназначено для выявления клостридий (бактерий, живущих и растущих только при отсутствии кислорода) и актиномицетов (микроорганизмов, соединяющих в себе признаки грибов и бактерий).
Показания к исследованию
Посев отделяемого верхних дыхательных путей
Посев раневого отделяемого и тканей
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
Тестирование назначается при наличии гнойно-воспалительных заболеваний глаз:
Особую группу риска составляют лица, пользующиеся контактными линзами.
Посев отделяемого половых органов (соскоб)
Посев отделяемого из уха
Показанием к проведению теста является наличие гнойных и негнойных отитов (воспаления уха).
Посев пункционного материала
Тестирование назначается при наличии гнойно-воспалительных заболеваний:
Посев на анаэробную микрофлору
Тестирование рекомендуется проводить:
Интерпретация исследования
Посев отделяемого верхних дыхательных путей
Результат обследования выдается на бланке лаборатории. Пациент получает следующую информацию:
В зависимости от вида обнаруженных возбудителей предлагается перечень противомикробных средств.
Если в результате посева дала рост в незначительном количестве нормальная, условно-патогенная или сопутствующая флора, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Данные, предоставляемые пациенту после обследования, содержат следующую информацию:
Выбор антимикробных средств производится в зависимости от идентифицированных бактерий.
Данное обследование не предназначено для определения вида грибов и их чувствительности к антигрибковым препаратам. Если возникает подозрение на грибковую инфекцию, проводится отдельное тестирование (посев на дрожжеподобные грибы).
Норма – желчь стерильна.
При отборе пробы методом дуоденального зондирования не исключено попадание в пробу сапрофитной микрофлоры (т.е. питающейся мертвой, разлагающейся органикой) рта и верхних отделов пищеварительного тракта (глотки, пищевода, желудка).
Если после посева в незначительном количестве дала рост нормальная, условно-патогенная или сопутствующая флора, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев раневого отделяемого и тканей
После проведения исследования пациент получает следующую информацию:
Противомикробные препараты подбираются в зависимости от вида обнаруженных возбудителей.
Попадание в посев микроорганизмов с кожи может вызвать незначительный рост сапрофитных бактерий.
При наличии заболевания происходит значительный рост бактерий, являющихся его причиной. Высокий титр позволяет диагностировать инфекцию. Количество колоний в таком случае превышает 10 000 КОЕ/тампон.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
После исследования предоставляются следующая информация:
Выбор антимикробных препаратов, рекомендуемых для проведения лечения, осуществляется исходя из вида выделенных бактерий.
Если есть вероятность грибковой инфекции, то проводится отдельный тест – «Посев на дрожжеподобные грибы».
Результаты интерпретируются следующим образом:
Посев отделяемого половых органов (соскоб)
Информация, предоставляемая после исследования:
Определение антимикробных препаратов осуществляется исходя из вида выделенных бактерий.
Результаты интерпретируются следующим образом:
При выявлении стрептококков Streptococcus agalactiae и Streptococcus pyogenes, являющихся патогенными (вызывающими заболевание), обязательно определяется чувствительность к антибиотикам независимо от количества колоний в единице объема.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев отделяемого из уха
После проведения исследования пациент получает следующую информацию:
Антимикробные препараты назначаются в зависимости от вида обнаруженных возбудителей.
Нормой является отсутствие роста.
Данный тест не предусматривает определение вида грибов и их чувствительности к противогрибковым препаратам.
Если в посев попали микроорганизмы с кожи, то происходит незначительный рост сапрофитных или условно-патогенных бактерий.
Если имеет место заболевание, то происходит рост бактерий, его вызывающих. Количество колоний в таком случае превышает 100 000 кое.
Если в наличие явные признаки заболевания, а рост при посеве отсутствует, целесообразно повторить отбор материала, т.к. он мог быть собран неправильно или на фоне применения антибиотиков.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев пункционного материала
После проведения исследования пациенту выдается следующая информация:
Выбор антимикробных препаратов осуществляется в зависимости от вида выявленных микроорганизмов.
Норма – рост отсутствует.
Если в посеве обнаружено присутствие представителей другой микрофлоры, попавших туда случайно из воздуха, с поверхности кожи или каким-то другим образом, об этом тоже сообщается в описании результатов.
В рамках теста не определяется вид грибов и их чувствительность к противогрибковым препаратам.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев на анаэробную микрофлору
Результат исследования включает в себя информацию о наличии или отсутствии роста бактерий. Положительный ответ подразумевает дополнительное определение чувствительности к антибиотикам.
Норма: рост при посеве отсутствует.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх
Дата исследования: хх.хх.хххх
Исследование
Результат
Нормы интерпретации
Примечание
[411] Посев на микрофлору (идентификация агента и чувствительность к аб)